Septinas de Ciona intestinalis: estudos voltados à formação de heterocomplexos (2019)
- Authors:
- Autor USP: MORAIS, SINARA TEIXEIRA DO BRASIL - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FCI
- DOI: 10.11606/T.76.2019.tde-28082019-153549
- Subjects: PROTEÍNAS; BIOQUÍMICA
- Keywords: Ciona intestinalis; Filamentos; Filaments; Heterocomplexes; Heterocomplexos; Septinas; Septins
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Septinas são proteínas que ligam GTP e interagem entre si formando heterocomplexos, os quais se organizam em filamentos e estruturas de maior nível de organização. Em humanos são encontrados 13 genes que codificam septinas, as quais se dividem em 4 grupos com base na similaridade de sua organização estrutural. Análises filogenéticas identificaram quatro septinas ortólogas no deuterostômio Ciona intestinalis, as quais apresentam, cada uma, identidade com um dos quatro grupos de septinas de mamíferos. Tais proteínas foram nomeadas CiSEPT2, CiSEPT6, CiSEPT7 e CiSEPT9 devido a identidade com as septinas humanas. Sabe-se que septinas de diferentes grupos interagem entre si formando heterocomplexos e, assim, a possibilidade de formar um oligômero único em C. intestinalis permite um modelo mais simples para o estudo da organização dos filamentos. Análises de bioinformática identificaram nessas proteínas motivos estruturais típicos de septinas, incluindo resíduos conservados para a ligação e hidrólise do GTP. As proteínas foram produzidas de forma heteróloga e a capacidade hidrolítica tanto de CiSEPT2 como de CiSEPT7 foiram confirmadas diretamente. Em contrapartida, CiSEPT6 não apresentou atividade catalítica. Um sistema de coexpressão foi construído no qual as quatro septinas de C. intestinalis foram co-expressas e co-purificadas em diferentes arranjos, resultando na formação de heterocomplexos parciais além daquele contendo as quatro subunidades. A avaliação do estado oligoméricodos heterocomplexos parciais mostrou que estes correspondem majoritariamente a tetrâmeros e hexâmeros quando formados, respectivamente, por duas ou três subunidades. Estes oligômeros foram analisados por microscopia eletrônica de transmissão (MET) em que se observou que os mesmos se dispõem na forma de um bastão. Ensaios ainda mostraram que a polimerização desses oligômeros é dependente de CiSEPT2 sugerindo que esta subunidade esteja possivelmente posicionada na extremidade do heterocomplexo. Adicionalmente, ensaios de polimerização realizados com o complexo CiSEPT2/6/7/9 revelaram que este é capaz de interagir com filamentos adjacentes, possivelmente via coiled-coil, formando estruturas de mais alta ordem, similar aos já observados em S. cerevisiae. Finalmente, experimentos utilizando termoforese em microescala (MST) mostraram uma maior afinidade de interação entre as subunidades quando oligômeros estão envolvidos, indicando que estes podem atuar como fator de nucleação para a formação dos heterocomplexos. Esse trabalho apresenta os primeiros estudos de caracterização das septinas de C. intestinalis mostrando a formação do heterocomplexo e representa um modelo simplificado e viável para estudos estruturais relativos a formação de filamentos de septinas. Assim, através de uma abordagem comparativa com complexos oriundos de outros organismos, este novo complexo poderá contribuir para a compreensão do mecanismo de montagem e controle da polimerização de septinas
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2019
- Data da defesa: 24.04.2019
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
- URL de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
MORAIS, Sinara Teixeira do Brasil. Septinas de Ciona intestinalis: estudos voltados à formação de heterocomplexos. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2019. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-28082019-153549/. Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Morais, S. T. do B. (2019). Septinas de Ciona intestinalis: estudos voltados à formação de heterocomplexos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-28082019-153549/ -
NLM
Morais ST do B. Septinas de Ciona intestinalis: estudos voltados à formação de heterocomplexos [Internet]. 2019 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-28082019-153549/ -
Vancouver
Morais ST do B. Septinas de Ciona intestinalis: estudos voltados à formação de heterocomplexos [Internet]. 2019 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-28082019-153549/ - Estudos estruturais da SEPT8 e análise de suas interações com SEPT5 e SEPT7
- Ohmic heating attenuation of Lactobacillus acidophilus LA-5: Effects on bioactive peptide profile, rheology aspects, and fatty acid profile of Minas Frescal cheese
- Effect of ohmic heating in bioactive peptides, volatile compounds, and fatty acid profile in a high-protein vanilla flavoured milk drink
- Functional benefits of probiotic fermented dairy drink elaborated with sheep milk processed by ohmic heating
- Bioactivity and volatile compound evaluation in sheep milk processed by ohmic heating
- In vivo functional and health benefits of a prebiotic soursop whey beverage processed by high-intensity ultrasound: Study with healthy Wistar rats
- Bioactive peptides, volatile compounds, and fatty acid profile of high protein flavored milk processed by ohmic heating
- Impact of ohmic heating on the bioactive peptide profile of prebiotic whey orange flavoured drink
- Impact of UV-C pretreatment on β-lactoglobulin hydrolysis by trypsin: Production and bioavailability of bioactive peptides
- Pyrylazo dye: A novel azo dye structure with photoinduced proton release and highlighted photophysical properties in biological media
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.76.2019.tde-28082019-153549 (Fonte: oaDOI API)
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
