Estudos estruturais da SEPT8 e análise de suas interações com SEPT5 e SEPT7 (2014)
- Authors:
- Autor USP: MORAIS, SINARA TEIXEIRA DO BRASIL - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FCI
- Subjects: BIOQUÍMICA; PROTEÍNAS
- Keywords: Co-expressão; Estudos estruturais; Septinas
- Language: Português
- Abstract: Septinas são proteínas que ligam GTP e interagem entre si formando heterocomplexos, os quais formam filamentos e estruturas de maior nível de organização. Tais filamentos, além de se mostrarem importantes durante a citocinese também podem estar envolvidos em outros processos celulares tais como determinação da polaridade celular e reorganização do citoesqueleto. As septinas, inicialmente descobertas em Saccharomyces cerevisiae, já foram identificadas também em fungos, algas-verdes, mamíferos, porém nunca em plantas. Tipicamente, septinas apresentam três domínios estruturais compostos por um domínio central de ligação ao GTP flanqueado por um N-terminal variável e um C-terminal que pode conter sequências do tipo coiled-coil. Este trabalho teve como objetivo a caracterização do domínio de ligação a GTP da septina 8 humana (SEPT8G) por meio de estudos biofísicos. Nesse sentido, SEPT8G foi eficientemente produzida em E. coli, tendo seu estado dimérico em solução confirmado por cromatografia de exclusão molecular. Diferentemente das outras septinas já reportadas, mesmo dimérica a SEPT8G apresentou-se na forma apo. Ensaios de atividade GTPásica foram realizados, confirmando a incapacidade dessa septina em hidrolisar o GTP. Ainda, análises de estabilidade térmica por Dicroísmo Circular revelaram que a presença do íon magnésio leva à diminuição de sua estabilidade estrutural. Baseando-se em resultados prévios de interação obtidos pela técnica do duplo-híbrido em leveduras, estudosvoltados à análise da interação entre as septinas 7 e 8 e, posteriormente, entre as septinas 5, 7 e 8 foram realizados. A co-purificação do complexo formado pelas septinas 7 e 8 mostrou-se dependente da região C-terminal completa de SEPT7 de modo que, quando ausente, a interação mostrou-se expressivamente prejudicada. Já o complexo formado pelas septinas 5/7/8 foi obtido contendo as três proteínas em frações equimolares e solúveis, disponibilizando assim um novo heterocomplexo de septinas para ensaios funcionais e estruturais
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2014
- Data da defesa: 29.05.2014
-
ABNT
MORAIS, Sinara Teixeira do Brasil. Estudos estruturais da SEPT8 e análise de suas interações com SEPT5 e SEPT7. 2014. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2014. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-05082014-082458/. Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Morais, S. T. do B. (2014). Estudos estruturais da SEPT8 e análise de suas interações com SEPT5 e SEPT7 (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-05082014-082458/ -
NLM
Morais ST do B. Estudos estruturais da SEPT8 e análise de suas interações com SEPT5 e SEPT7 [Internet]. 2014 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-05082014-082458/ -
Vancouver
Morais ST do B. Estudos estruturais da SEPT8 e análise de suas interações com SEPT5 e SEPT7 [Internet]. 2014 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-05082014-082458/ - Septinas de Ciona intestinalis: estudos voltados à formação de heterocomplexos
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