Tese

Investigação do potencial antineoplásico de diferentes classes de inibidores da via IGF1R-IRS1/2 em neoplasia mieloproliferativa (2021)

• Authors:
  • Fernandes, Jaqueline Cristina
  • Machado Neto, João Agostinho (Orientador)
  • Traina, Fabiola (Orientador)
• Autor USP: FERNANDES, JAQUELINE CRISTINA - FMRP
• Unidade: FMRP
• Sigla do Departamento: RBP
• Subjects: NEOPLASIAS; TRANSTORNOS MIELOPROLIFERATIVOS; CÉLULAS-TRONCO; DIFERENCIAÇÃO CELULAR; ANTINEOPLÁSICOS
• Keywords: Myeloproliferative neoplasia; Neoplasia mieloproliferativa; NT157; OSI-906; Signaling pathways; Vias de sinalização
• Agências de fomento:
  • Financiamento CAPES
  • Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
    Processo FAPESP: 2016/14049-0
  • Financiamento CNPq
  • Financiamento FAEPA
  • Financiamento CEPID-FAPESP
• Language: Português
• Abstract: A via de sinalização de IGF1R-IRS1/2 é um alvo potencial em neoplasias mieloproliferativas (NMP). O silenciamento do substrato 2 do receptor de insulina (IRS2) reduziu a viabilidade e aumentou a apoptose em células JAK2V617F. A haploinsuficiência de Igf1r provou uma reversão notável do fenótipo maligno em um modelo de camundongo knockin JAK2V617F. NT157, OSI-906 e NVP-AEW54 são inibidores da via IGF1R-IRS1/2 com efeito antineoplásico em uma variedade de linhagens tumorais, entretanto a melhor estratégia farmacológica para NMP e as consequências moleculares desses inibidores permanece indeterminada. O objetivo deste trabalho foi investigar o potencial antineoplásico de diferentes classes de inibidores da via IGF1R-IRS1/2 em neoplasia mieloproliferativa JAK2V617F. Células Ba/F3 JAK2WT e Ba/F3 JAK2V617F foram submetidas à inibição farmacológica de IGF1R usando NT157 (0,2, 0,4, 0,8, 1,6 e 3,2 μM), OSI-906 (2,5, 5, 10, 20 e 40 μM) e NVP-AEW541 (2, 4, 6, 8 e 10 μM) e a viabilidade celular (MTT), apoptose (anexina V/PI e caspase 3), proliferação celular (Ki-67) e expressão/ativação proteica (Western blot) foram avaliadas. NT157 e OSI-906 foram testados em modelo murino de NMP knockin para JAK2V617F in vivo e ex vivo e em amostras de pacientes com mielofibrose primária. A análise estatística foi realizada pelo teste t de Student ou teste de Mann-Whitney. Em células Ba/F3 JAK2V617F, NT157 na dose ≥0,4 μM, reduziu significativamente a viabilidade e proliferação celular e induziu apoptose em todos os tempos de tratamento. OSI-906 reduziu a viabilidade de células Ba/F3 JAK2V617F a partir da dose de 10 μM em 24 e 48 horas; e induziu a apoptose apenas na dose mais alta (40 μM). NVP-AEW54 reduziu a viabilidade e aumentou a apoptose a partir da dose de 2 μM em todos os tempos de tratamento (p<0,05). Resultados semelhantes foram encontrados na ativação da caspase 3 emcélulas Ba/F3 JAK2V617F por western blotting. Em células Ba/F3 JAK2WT, com a presença de meio condicionado com IL3, todos os três inibidores afetaram o crescimento e induziram apoptose de maneira semelhante a célula mutada. NT157, OSI-906 e NVP-AEW54 reduziram a fosforilação/ativação de Irs1/2, Igf1r, Jak2, Stat3, Stat5 e P70s6k em células Ba/F3 JAK2V617F; NT-157 aumentou a fosforilação de Erk1/2 e não modulou Akt1/2/3; NVP-AEW541 não modulou Erk1/2. OSI-906 induziu autofagia a partir da dose de 5uM em células Ba/F3 JAK2V617F. NT157 (6,4μM), OSI-906 (≥20 μM) e NVP-AEW54 (≥6 μM) ex vivo reduziram a viabilidade de células de camundongo expressando a forma mutada (V617F) ou selvagem da proteína JAK2. NT157 e OSI-906 reduziram a formação de colônia e inibiram a fosforilação de Igf1r e Stat3; NT157 aumentou a fosforilação de Akt1/2/3 e Erk1/2 em células de camundongo expressando a forma mutada (V617F) da proteína JAK2. NT157 não modulou os parâmetros hematimétricos e o tamanho do baço do modelo murino de NMP JAK2 V617F knockin. O tratamento com OSI-906 no modelo murino de NMP knockin para JAK2V617F resultou em redução dos progenitores hematopoéticos eritroides e aumento dos progenitores mieloides da medula óssea, mas não modulou os parâmetros hematimétricos. OSI-906 reduziu o crescimento tumoral no modelo de camundongo induzido por células Ba/F3 JAK2V617F. NT157 e OSI-906 reduziram a formação de colônia em amostras de sangue periférico de pacientes com mielofibrose. Em conclusão, OSI-906, NVP-AEW54 e NT157 apresentam efeitos antineoplásicos semelhantes em modelo de NMP JAK2V617F, porém foi observado variação dos efeitos celulares e moleculares de acordo com o inibidor testado. Os resultados dos estudos pré-clínicos com os inibidores testados reforçam a implicação da via IGF1R/IRS na patogênese da NMP JAK2V617F ao mesmo tempo que indicam oefeito multialvo das drogas
• Imprenta:
  • Publisher place: Ribeirão Preto
  • Date published: 2021
• Data da defesa: 11.06.2021


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How to cite

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• ABNT

  FERNANDES, Jaqueline Cristina. Investigação do potencial antineoplásico de diferentes classes de inibidores da via IGF1R-IRS1/2 em neoplasia mieloproliferativa. 2021. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17154/tde-08092021-135736/. Acesso em: 16 out. 2024.

• APA

  Fernandes, J. C. (2021). Investigação do potencial antineoplásico de diferentes classes de inibidores da via IGF1R-IRS1/2 em neoplasia mieloproliferativa (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17154/tde-08092021-135736/

• NLM

  Fernandes JC. Investigação do potencial antineoplásico de diferentes classes de inibidores da via IGF1R-IRS1/2 em neoplasia mieloproliferativa [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 16 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17154/tde-08092021-135736/

• Vancouver

  Fernandes JC. Investigação do potencial antineoplásico de diferentes classes de inibidores da via IGF1R-IRS1/2 em neoplasia mieloproliferativa [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 16 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17154/tde-08092021-135736/

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