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O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo (2010)

  • Authors:
  • Autor USP: QUEIROZ, MARIANA SANTOS DE - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBP
  • Subjects: DROSOPHILA; LINHAGENS ANIMAIS; EXPRESSÃO GÊNICA; BIOLOGIA CELULAR
  • Language: Português
  • Abstract: A2BPI/FOX-I pertence a uma nova familia de proteinas ligantes de RNA conservadas evolutivamente. Em Drosophila melanogaster o ortólogo de FOX-I é anotado como GC32062 e codifica cinco isoformas geradas por splicing alternativo, de acordo com análises in silico baseadas num cDNA completo e em ESTs. Com o objetivo de contribuir para o entendimento da função celular de CG32062, aqui denominado de dFox- I, analisamos por microscopia confocal o padrão de imunolocalização desta proteina no sistema visual de D. melanogaster durante o desenvolvimento. Nos discos imaginais de olho, a marcação foi localizada predominante na porção posterior ao sulco morfogenético, região de determinação, proliferação e diferenciação celular. As retinas pupais apresentaram um padrão de marcação temporal dinâmico e especifico de tipo celular. A nivel sub-celular, dFox-l mostrou-se concentrada em focos citoplasmáticos sensiveis à tratamento com RNAse e inibidores da sintese protéica (cicloheximida e puromicina), de modo similar ao demonstrado para proteinas constituintes de corpos de processamento de RNA (Pbodies). Adicionalmente, verificamos que 55% dos focos positivos para dFox-l colocalizaram-se com particulas contendo a RNA helicase Me31B, confirmando sua localização em P-bodies, particulas associadas com processos de triagem/degradação/estocagem de mRNAs. Juntos estes dados sugerem que dFox-l participe do desenvolvimento do olho de D. melanogaster, atuando em processos com impacto no controle da tradução. Na tentativa de estabelecer uma ferramenta para estudos funcionais in vivo de dFox-l, analisamos a prole do cruzamento de linhagens trangênicas, construidas de modo a expressarem um RNA dupla-fita do CG32062 sob o comando de UAS (34046/GD e 3404 7/GD), com animais carregando o transgene gmr- Gal4, que direciona a expressão dependente de UAS para as células precursoras do olho. Nossos resultadosdemonstraram que tanto os animais gmr-Gal4; 34046/GD como os gmr-Gal4;34047/GD apresentaram vários defeitos na formação do olho. No entando, análises por qPCR e western blot indicaram que os níveis de dFox-1 nos discos imaginais de olho de pupas jovens gmr-Gal4;34046/GD ou gmrGal4;34047/GD não estavam significativamente alterados em relação ao controle, sugerindo que os fenótipos observados não são decorrentes de interferência na expressão de dFox-1
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 13.05.2010

  • How to cite
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    • ABNT

      QUEIROZ, Mariana Santos de; PAÇÓ-LARSON, Maria Luisa. O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo. 2010.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2010.
    • APA

      Queiroz, M. S. de, & Paçó-Larson, M. L. (2010). O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Queiroz MS de, Paçó-Larson ML. O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo. 2010 ;
    • Vancouver

      Queiroz MS de, Paçó-Larson ML. O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo. 2010 ;

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