O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo (2010)
- Autores:
- Autor USP: QUEIROZ, MARIANA SANTOS DE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Assuntos: DROSOPHILA; LINHAGENS ANIMAIS; EXPRESSÃO GÊNICA; BIOLOGIA CELULAR
- Idioma: Português
- Resumo: A2BPI/FOX-I pertence a uma nova familia de proteinas ligantes de RNA conservadas evolutivamente. Em Drosophila melanogaster o ortólogo de FOX-I é anotado como GC32062 e codifica cinco isoformas geradas por splicing alternativo, de acordo com análises in silico baseadas num cDNA completo e em ESTs. Com o objetivo de contribuir para o entendimento da função celular de CG32062, aqui denominado de dFox- I, analisamos por microscopia confocal o padrão de imunolocalização desta proteina no sistema visual de D. melanogaster durante o desenvolvimento. Nos discos imaginais de olho, a marcação foi localizada predominante na porção posterior ao sulco morfogenético, região de determinação, proliferação e diferenciação celular. As retinas pupais apresentaram um padrão de marcação temporal dinâmico e especifico de tipo celular. A nivel sub-celular, dFox-l mostrou-se concentrada em focos citoplasmáticos sensiveis à tratamento com RNAse e inibidores da sintese protéica (cicloheximida e puromicina), de modo similar ao demonstrado para proteinas constituintes de corpos de processamento de RNA (Pbodies). Adicionalmente, verificamos que 55% dos focos positivos para dFox-l colocalizaram-se com particulas contendo a RNA helicase Me31B, confirmando sua localização em P-bodies, particulas associadas com processos de triagem/degradação/estocagem de mRNAs. Juntos estes dados sugerem que dFox-l participe do desenvolvimento do olho de D. melanogaster, atuando em processos com impacto no controle da tradução. Na tentativa de estabelecer uma ferramenta para estudos funcionais in vivo de dFox-l, analisamos a prole do cruzamento de linhagens trangênicas, construidas de modo a expressarem um RNA dupla-fita do CG32062 sob o comando de UAS (34046/GD e 3404 7/GD), com animais carregando o transgene gmr- Gal4, que direciona a expressão dependente de UAS para as células precursoras do olho. Nossos resultadosdemonstraram que tanto os animais gmr-Gal4; 34046/GD como os gmr-Gal4;34047/GD apresentaram vários defeitos na formação do olho. No entando, análises por qPCR e western blot indicaram que os níveis de dFox-1 nos discos imaginais de olho de pupas jovens gmr-Gal4;34046/GD ou gmrGal4;34047/GD não estavam significativamente alterados em relação ao controle, sugerindo que os fenótipos observados não são decorrentes de interferência na expressão de dFox-1
- Imprenta:
- Local: Ribeirão Preto
- Data de publicação: 2010
- Data da defesa: 13.05.2010
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ABNT
QUEIROZ, Mariana Santos de. O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo. 2010. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. . Acesso em: 20 set. 2024. -
APA
Queiroz, M. S. de. (2010). O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Queiroz MS de. O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo. 2010 ;[citado 2024 set. 20 ] -
Vancouver
Queiroz MS de. O ortólogo de A2BP1/FOX-1 em Drosophila melanogaster: imunolocalização no sistema visual durante o desenvolvimento e análises de uma ferramenta potencial para estudos funcionais in vivo. 2010 ;[citado 2024 set. 20 ]
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