Caracterização bioquímica e funcional de β-glicosidases recombinantes da família 3 do CAZy de Thermothelomyces thermophilus (TthBgl3) (2025)
- Authors:
- Autor USP: SARAIVA, ANA LUIZA DA ROCHA FORTES - EEL
- Unidade: EEL
- Sigla do Departamento: LOT
- DOI: 10.11606/T.97.2025.tde-20082025-135801
- Subjects: BIOCOMBUSTÍVEIS; SACARIFICAÇÃO
- Keywords: Aspergillus nidulans; Aspergillus nidulans; ?-glicosidases fúngicas; Biocombustíveis; Biofuels; Fungal ?-glucosidases; Glicosídeo hidrolase 3; Glycoside hydrolase 3; Sacarificação; Saccharification
- Language: Português
- Abstract: A biomassa lignocelulósica proveniente da cana-de-açúcar constitui uma fonte promissora para a produção de biocombustíveis, como o etanol de segunda geração (E2G). Nesse processo, as -glicosidases (BGLs) desempenham um papel essencial na etapa final da sacarificação da celulose, convertendo os celo-oligossacarídeos liberados pela ação das celulases em glicose, a qual segue para a fermentação. A eficiência dessa sacarificação depende da ação sinérgica entre as enzimas do complexo celulolítico. Entre essas enzimas, as BGLs fúngicas das famílias de glicosídeo hidrolase 1 e 3 (GH1 e GH3) despertam especial interesse industrial por reduzirem a inibição das celulases a montante - causada pelo acúmulo de celobiose, subproduto da reação. No entanto, a maioria das BGLs fúngicas já caracterizadas apresentam baixa tolerância à glicose, além de limitações em estabilidade e sinergia com as celulases presentes nos coquetéis enzimáticos. Diante desse cenário, a busca por novas BGLs estáveis - capazes de atuar eficientemente nas condições de sacarificação da biomassa lignocelulósica e com maior eficiência na conversão de açúcares - tornou-se um objetivo fundamental para o avanço das biorrefinarias. O fungo termofílico Thermothelomyces thermophilus destaca-se por produzir celulases com alta atividade específica e termoestabilidade superior, além de abrigar um número expressivo de genes que codificam BGLs da família GH3. Assim, este trabalho avalia a viabilidade de produção de BGLsrecombinantes do fungo T. thermophilus (TthBgls3), bem como sua caracterização bioquímica e estrutural. A maquinaria de expressão em A. nidulans utilizada neste estudo para produção heteróloga de duas TthBgls3, contribuiu para melhoria de suas propriedades físico-químicas e funcionais. Ambas as variantes do TthBgl3 exibiram alta termoestabilidade, retendo até 80% de sua atividade por 160 horas TthBgl3A em pH 5,0 e 55 °C, e TthBgl3C em pH 5,5 e 50 °C. Também foi observada alta atividade das duas enzimas em substratos celo-oligossacarídeos com maiores graus de polimerização (DP), destacando seu potencial biotecnológico para conversão de biomassa lignocelulósica. A suplementação do coquetel enzimático comercial Celluclast com as duas TthBgl3s para a conversão do bagaço de cana-de-açúcar pré-tratado resultou na hidrólise de 44% e 48% da celulose presente na biomassa, levando a incrementos de 71% e 85% no rendimento de glicose para TthBgl3A e TthBgl3C, respectivamente. Além disso, a alta estabilidade e atividade catalítica das duas enzimas em condições salinas, destaca seu potencial halofilico como fonte alternativa promissora para aplicação em biorrefinarias baseadas em água do mar
- Imprenta:
- Data da defesa: 24.06.2025
- Status:
- Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access)
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- Versão publicada (Published version)
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-
ABNT
SARAIVA, Ana Luiza da Rocha Fortes. Caracterização bioquímica e funcional de β-glicosidases recombinantes da família 3 do CAZy de Thermothelomyces thermophilus (TthBgl3). 2025. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Lorena, 2025. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/97/97140/tde-20082025-135801/. Acesso em: 01 abr. 2026. -
APA
Saraiva, A. L. da R. F. (2025). Caracterização bioquímica e funcional de β-glicosidases recombinantes da família 3 do CAZy de Thermothelomyces thermophilus (TthBgl3) (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Lorena. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/97/97140/tde-20082025-135801/ -
NLM
Saraiva AL da RF. Caracterização bioquímica e funcional de β-glicosidases recombinantes da família 3 do CAZy de Thermothelomyces thermophilus (TthBgl3) [Internet]. 2025 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/97/97140/tde-20082025-135801/ -
Vancouver
Saraiva AL da RF. Caracterização bioquímica e funcional de β-glicosidases recombinantes da família 3 do CAZy de Thermothelomyces thermophilus (TthBgl3) [Internet]. 2025 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/97/97140/tde-20082025-135801/
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