Avaliação do potencial anticâncer da L-lisina α-oxidase recombinante de Trichoderma harzianum (2020)
- Authors:
- Autor USP: COSTA, MARIANA DO NASCIMENTO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- DOI: 10.11606/T.17.2020.tde-11072024-165023
- Subjects: TRICHODERMA; ANTINEOPLÁSICOS; ENZIMAS; AMINOÁCIDOS; NEOPLASIAS; APOPTOSE
- Keywords: Trichoderma harzianum; Anticancer; Anticâncer; L-lisina α-oxidase; L-lysine α-oxidase (LO)
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A L-lisina α-oxidase (LO) de Trichoderma harzianum é uma enzima da família das Laminoácido oxidases (LAAOs), flavoproteínas que são alvo de grande interesse médico devido a sua alta toxicidade sobre diversos patógenos e linhagens de células tumorais. A LO é de grande interesse biotecnológico, porque assim com outras LAAOs, pode promover a depleção de aminoácidos do ambiente tumoral, afetando reações metabólicas essenciais para o crescimento das células do câncer. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial anticâncer da LO recombinante (rLO) de T. harzianum, bem como caracterizar o tipo de morte induzido e as vias de sinalização envolvidas. Inicialmente, foram determinadas as condições de estocagem para melhorar a estabilidade de rLO e nossos resultados mostraram que rLO é mais estável quando armazenada em solução de glicerol 50%. Determinou-se que a cauda de GST a qual rLO está fusionada é importante para a estabilidade da enzima e por isso foi mantida. Porém, a proteína GST sozinha não foi tóxica para as células, indicando que o efeito observado é atribuído a rLO. Em seguida, a toxicidade foi testada em células Jurkat por citometria de fluxo e observou-se que concentrações maiores que 1 mU/mL de rLO reduziram significativamente a viabilidade de Jurkat, apresentando um efeito dose-dependente. Além disso, os marcadores Anexina V-FITC e PI foram utilizados para rastrear eventos de apoptose e apoptose tardia, que foi confirmado por citometria de fluxo. Também foi feita uma análise de microscopia time-lapse que mostrou que as células estimuladas com rLO entram em apoptose depois de cerca de 8 horas do tratamento. A toxicidade de rLO também foi testada em células não tumorais da linhagem HEK 293T que não teve a viabilidade afetada por rLO, bem como não induziu apoptose nesse tipo celular. Por fim, estudou-se, através do uso deinibidores, as possíveis vias de sinalização envolvidas na indução de morte das células Jurkat tratadas com rLO. As vias que responderamm ao estímulo de rLO foram ERK, JNK e p38. Conclui-se, portanto, que LO é capaz de reduzir a viabilidade e promover apoptose em células da linhagem Jurkat através da ativação de MAPKs que regulam diversas atividades celulares relacionadas ao desenvolvimento do câncer, incluindo proliferação, diferenciação, apoptose, autofagia e inflamação
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- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2020
- Data da defesa: 17.04.2020
- Este periódico é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
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ABNT
COSTA, Mariana do Nascimento. Avaliação do potencial anticâncer da L-lisina α-oxidase recombinante de Trichoderma harzianum. 2020. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-11072024-165023/. Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Costa, M. do N. (2020). Avaliação do potencial anticâncer da L-lisina α-oxidase recombinante de Trichoderma harzianum (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-11072024-165023/ -
NLM
Costa M do N. Avaliação do potencial anticâncer da L-lisina α-oxidase recombinante de Trichoderma harzianum [Internet]. 2020 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-11072024-165023/ -
Vancouver
Costa M do N. Avaliação do potencial anticâncer da L-lisina α-oxidase recombinante de Trichoderma harzianum [Internet]. 2020 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-11072024-165023/ - Produção, purificação, caracterização e expressão heteróloga de L-lisina α-oxidase de Trichoderma harzianum e avaliação de seu pontencial antitumoral
- Cytotoxic activity of l-lysine alpha-oxidase against leukemia cells
- New genomic approaches to enhance biomass degradation by the industrial fungus Trichoderma reesei
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.17.2020.tde-11072024-165023 (Fonte: oaDOI API)
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