Tese

Avaliação da mutagenicidade, genotoxicidade e alterações no perfil de expressão gênica induzida pela sinefrina em células humanas in vitro (2018)

• Authors:
  • Ribeiro, Diego Luís
  • Antunes, Lusânia Maria Greggi (Orientador)
  • Barcelos, Gustavo Rafael Mazzaron (coorient)
• Autor USP: RIBEIRO, DIEGO LUÍS - FMRP
• Unidade: FMRP
• Sigla do Departamento: RGE
• DOI: 10.11606/T.17.2018.tde-28062024-145003
• Subjects: DANO AO DNA; ESTRESSE OXIDATIVO; EXPRESSÃO GÊNICA; OBESIDADE; CALORIAS; SUPLEMENTOS DIETÉTICOS
• Keywords: Danos ao DNA; DNA damage; Estresse oxidativo; Expressão gênica; Gene expression; Oxidative stress; Sinefrina; Synephrine; Termogênicos; Thermogenics
• Agências de fomento:
  • Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
  • Financiamento CNPq
  • Financiamento CAPES
• Language: Português
• Abstract: Atualmente, a obesidade é um dos maiores problemas globais de saúde pois aumenta o risco de desenvolvimento de doenças como o câncer. Como alternativa para perda de peso, suplementos termogênicos contendo o proto-alcalóide sinefrina são amplamente utilizados para estimular a queima de calorias. Dúvidas surgiram sobre os efeitos da sinefrina desde que esta, apresenta semelhanças com efedrina e anfetaminas. Existe ainda, uma lacuna na literatura sobre os efeitos da sinefrina na indução de danos no DNA e modulação da expressão gênica em células humanas. A proposta desta investigação foi determinar os efeitos de tratamentos com sinefrina sobre danos no DNA, estado redox e alterações na expressão gênica em linhagens celulares humanas hepáticas, gástricas e intestinais in vitro. Como modelo de células humanas foram utilizadas células HepG2 (carcinoma hepatocelular), GAS (epitélio gástrico não tumoral) e Caco-2 (adenocarcinoma colorretal). Inicialmente, foram realizados ensaios de citotoxicidade (MTT e Vermelho Neutro) com dez concentrações (25 - 5000 µM). Posteriormente, três concentrações (2, 20 e 200 µM) foram selecionadas para obtenção de dados sobre proliferação celular (conteúdo proteico e citometria de fluxo), genotoxicidade (cometa), mutagenicidade (micronúcleo), geração de espécies reativas (ERs) (H2DCFDA) e alterações no estado redox por quantificação das enzimas GSH, CAT, SOD mitocondrial e GPx e do produto de peroxidação malondialdeído (MDA). Por fim, efeitos da sinefrina sobre a expressão de genes (RT-qPCR) das vias de danos ao DNA e metabolismo energético foram avaliados. Sinefrina induziu ERs em células hepáticas (HepG2) e intestinais (Caco-2); além disso, em GAS aumentou CAT e GSH, em Caco-2 elevou os níveis de GSH e principalmente, em células hepáticas (HepG2) aumentou os níveis enzimáticos de GSH, GPx e da geração de MDA. Nosexperimentos de expressão, 20 e 200 µM aumentaram a transcrição dos genes MAPK1 e JUN em HepG2, GAS e Caco-2 evidenciando que sinefrina estimula a expressão de genes da via AMPK (Proteínas Quinases Ativadoras de Adenosina Monofosfato Cíclica) que regula o metabolismo de lipídios e glicose. Especificamente, em HepG2 a sinefrina induziu a expressão de TNF (citocina pró-inflamatória) e diminuiu a de LIPE (hidrólise de lipídeos) e AKT1 (proliferação). Em GAS, sinefrina diminuiu a expressão de TNF e aumentou a expressão dos genes ADCY3 (atividade catalítica) e AKT1. Similarmente em Caco-2, AKT1 e os genes PRKACA e GNAS (catabolismo) também aumentaram a expressão. Por fim, somente em Caco-2, 2 µM aumentou os níveis de transcritos de ATM, ATR e CHEK1 (danos ao DNA). Apesar destes resultados, não foram observados efeitos sobre a viabilidade, proliferação, ciclo celular e danos ao DNA. Em conclusão, este trabalho demonstrou que sinefrina não causou citotoxicidade e eventos genotóxicos e mutagênicos em células hepáticas, gástricas e intestinais humanas in vitro. Todavia, assim como anfetaminas, sinefrina demonstrou estimular significativamente a expressão de genes do metabolismo energético e causar efeitos pró-oxidativos principalmente em células hepáticas. Portanto, para representar a ausência de perigo de sinefrina ainda devem ser realizados experimentos com exposições crônicas em estudos in vivo para conclusões afirmativas aos usuários de termogênicos
• Imprenta:
  • Publisher place: Ribeirão Preto
  • Date published: 2018
• Data da defesa: 06.04.2018

Informações sobre o DOI: 10.11606/T.17.2018.tde-28062024-145003 (Fonte: oaDOI API)
• Este periódico é de acesso aberto
• Este artigo é de acesso aberto
• URL de acesso aberto
• Cor do Acesso Aberto: gold
• Licença: cc-by-nc-sa

---

How to cite

A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

• ABNT

  RIBEIRO, Diego Luís. Avaliação da mutagenicidade, genotoxicidade e alterações no perfil de expressão gênica induzida pela sinefrina em células humanas in vitro. 2018. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2018. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-28062024-145003/. Acesso em: 29 dez. 2025.

• APA

  Ribeiro, D. L. (2018). Avaliação da mutagenicidade, genotoxicidade e alterações no perfil de expressão gênica induzida pela sinefrina em células humanas in vitro (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-28062024-145003/

• NLM

  Ribeiro DL. Avaliação da mutagenicidade, genotoxicidade e alterações no perfil de expressão gênica induzida pela sinefrina em células humanas in vitro [Internet]. 2018 ;[citado 2025 dez. 29 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-28062024-145003/

• Vancouver

  Ribeiro DL. Avaliação da mutagenicidade, genotoxicidade e alterações no perfil de expressão gênica induzida pela sinefrina em células humanas in vitro [Internet]. 2018 ;[citado 2025 dez. 29 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-28062024-145003/

Últimas obras dos mesmos autores vinculados com a USP cadastradas na BDPI:

• Comparison of the effects of flavone cirsimarin on the proliferation, migration, and invasion of MCF-7 cells grown in 2D monolayer and 3D multicellular tumor spheroids
• Vitamin D supplementation alters the expression of genes associated with hypertension and did not induce DNA damage in rats
• Adaptive epigenetic response of glutathione (GSH)-related genes against lead (Pb)-induced toxicity, in individuals chronically exposed to the metal
• Caffeic acid and chlorogenic acid cytotoxicity, genotoxicity and impact on global DNA methylation in human leukemic cell lines
• p-Synephrine induces transcriptional changes via the cAMP/PKA pathway but not cytotoxicity or mutagenicity in human gastrointestinal cells
• BjussuLAAO-II induces cytotoxicity and alters DNA methylation of cell-cycle genes in monocultured/co-cultured HepG2 cells
• Cytotoxic, genotoxic, and oxidative stress-inducing effect of an l-amino acid oxidase isolated from Bothrops jararacussu venom in a co-culture model of HepG2 and HUVEC cells
• Analysis of the cytotoxic, genotoxic, mutagenic, and pro-oxidant effect of synephrine, a component of thermogenic supplements, in human hepatic cells in vitro
• Effects of sulforaphane on the oxidative response, apoptosis, and the transcriptional profile of human stomach mucosa cells in vitro
• Transcriptome and DNA methylation changes modulated by sulforaphane induce cell cycle arrest, apoptosis, DNA damage, and suppression of proliferation in human liver cancer cells