Clonagem, expressão recombinante e validação por microarray de proteínas alimentares potencialmente alergênicas (2019)
- Authors:
- Autor USP: SCHMITZ, GABRIELA JUSTAMANTE HÄNDEL - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBA
- DOI: 10.11606/T.9.2019.tde-14102022-152906
- Subjects: HIPERSENSIBILIDADE ALIMENTAR; PROTEÍNAS; CIÊNCIA DE ALIMENTOS
- Keywords: Alergia alimentar; Allergenic proteins; Expressão recombinante; Food allergy; Microarray; Microarray; Proteínas alergênicas; Recombinant expression
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A maioria das respostas alérgicas a alimentos é mediada por IgE, que pode ser detectada para fins de diagnóstico da alergia alimentar. No entanto, para isso é necessário que alérgenos purificados estejam disponíveis para a elaboração dos diferentes formatos de ensaio, inclusive por microarray, que se constitui em uma ferramenta bastante útil para análise simultânea, e também para a identificação de reatividade cruzada. A esse respeito, é imprescindível ampliar a plataforma de alérgenos que possam ser empregados para a confecção de microarrays. Atualmente, alguns alimentos que constituem objeto de interesse na clínica em função do número de casos de alergia, e sobre os quais as informações a respeito dos alérgenos são escassas, são: abacaxi, mamão, mandioca e manga. Assim, o objetivo desse trabalho foi clonar, expressar e purificar proteínas potencialmente alergênicas de alimentos de importância regional. Após confirmadas por ensaios imunológicos, essas proteínas foram utilizadas na construção e validação de um microarray através de ensaios com os soros de pacientes alérgicos aos alimentos selecionados. Para atingir esse objetivo, foram selecionadas proteínas potencialmente alergênicas coincidentes, apontadas tanto pela similaridade com espécies taxonomicamente mais próximas, quanto pela técnica 2D Western Blotting acoplada à espectrometria de massas. Dezenove proteínas, sendo 4 de abacaxi, 5 de mamão, 6 de mandioca e 4 de manga, foram expressas em Pichia pastoris, purificadas e impressas em um microarray. Após incubar essas proteínas com os soros dos pacientes alérgicos aos alimentos estudados, 18 proteínas mostraram-se potencialmente alergênicas. Além disso, foi observada reatividade cruzada entre proteínas dos alimentos estudados e também em relação ao látex e outros frutos
- Imprenta:
- Data da defesa: 12.03.2019
- Este periódico é de acesso aberto
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- URL de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
SCHMITZ, Gabriela Justamante Handel. Clonagem, expressão recombinante e validação por microarray de proteínas alimentares potencialmente alergênicas. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2019. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9131/tde-14102022-152906/. Acesso em: 08 nov. 2024. -
APA
Schmitz, G. J. H. (2019). Clonagem, expressão recombinante e validação por microarray de proteínas alimentares potencialmente alergênicas (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9131/tde-14102022-152906/ -
NLM
Schmitz GJH. Clonagem, expressão recombinante e validação por microarray de proteínas alimentares potencialmente alergênicas [Internet]. 2019 ;[citado 2024 nov. 08 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9131/tde-14102022-152906/ -
Vancouver
Schmitz GJH. Clonagem, expressão recombinante e validação por microarray de proteínas alimentares potencialmente alergênicas [Internet]. 2019 ;[citado 2024 nov. 08 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9131/tde-14102022-152906/ - Análise comparativa dos proteomas das raízes tuberosas de mandioca (Manihot esculenta Crantz) de variedades de mesa e indústria
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Informações sobre o DOI: 10.11606/T.9.2019.tde-14102022-152906 (Fonte: oaDOI API)
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