Controle epigenético da via de Wnt/β-catenina no acúmulo de células-tronco tumorais quimiorresistentes em carcinoma oral (2022)
- Authors:
- Autor USP: MILAN, THAÍS MORÉ - FCFRP
- Unidade: FCFRP
- Sigla do Departamento: 602
- DOI: 10.11606/D.60.2022.tde-05102022-113323
- Subjects: CARCINOMA; CÉLULAS-TRONCO; QUIMIOTERAPIA; QUIMIOTERÁPICOS; NEOPLASIAS BUCAIS
- Keywords: Cancer stem cells; Carcinoma oral; Células-tronco tumorais; Chemoresistance; Controle epigenético; Epigenetic control; Oral carcinoma; Quimiorresistência; Via de Wnt/β-catenina; Wnt/β-catenin signaling pathway
- Language: Português
- Abstract: O carcinoma oral é responsável por muitas mortes ao redor do mundo por originar recidivas e metástases devido as falhas na terapia. Os tratamentos convencionais destroem as células diferenciadas do tumor, porém a população de células-tronco tumorais é resistente e repovoa o tumor. A sinalização de Wnt/β-catenina está envolvida na manutenção, sobrevivência, auto-renovação e diferenciação das células-tronco tumorais e sua sinalização pode ser regulada por modificações epigenéticas. O objetivo do projeto foi identificar alterações epigenéticas envolvidas no controle da via de sinalização de Wnt/β-catenina e de seus alvos e investigar a participação da via no acúmulo de células-tronco tumorais e na quimiorresistência de linhagens celulares de carcinoma oral. Três linhagens de carcinoma oral selvagens (Cal27 WT; SCC9 WT; SCC25 WT) e resistentes à cisplatina (Cal27 CisR; SCC9 CisR; SCC25 CisR) e suas populações de células-tronco tumorais (CTT+) e não-tronco tumorais (CTT-) foram investigadas. Análises de qPCR foram realizadas para a avaliação da expressão gênica e Western Blot para avaliação dos níveis proteicos; a dose IC50 dos inibidores foi determinada por ensaio de viabilidade celular. Citometria de fluxo e formação de esferas identificaram as CTT+. Imunoprecipitação da cromatina foi realizada para identificar a regulação epigenética da via. O ensaio de xenoenxerto foi utilizado para investigar o potencial da via de Wnt/β-catenina como alvo terapêutico. Nós observamos o aumento da expressão de genes reguladores da maquinaria epigenética, como BRD7, EZH2, KDM4C e MLL1 e do gene CTNNB1, que codifica β-catenina, nas linhagens resistentes à cisplatina. Os genes upstream da via de Wnt/β-catenina, como APC e GSK3β, estavam diminuídos nas 3 linhagens quimiorresistentes, e os genes downstream FGF18 e MMP7 estavam aumentados. A populaçãode CTT+ apresentou maior expressão de genes envolvidos na metilação de histonas. β-catenina e as histonas metiladas H3K27me3 e H3K9me2 também estavam aumentadas nas linhagens resistentes à cisplatina e nas CTT+. O inibidor de EZH2 (UNC1999) e os inibidores de β-catenina (ICG-001 e FH535) reduziram a população de CTT+ e diminuíram as proteínas β-catenina e EZH2 nas linhagens quimiorresistentes. H3K27me3 também foi diminuída após tratamento com os inibidores. O tratamento com UNC1999 aumentou a expressão dos genes upstream APC e GSK3β, e os tratamentos com ICG-001, FH535 e UNC1999 foram efetivos na diminuição do gene downstream MMP7 nas CTT+. FH535 demonstrou eficácia para diminuir a população de CTT+, especialmente quando combinado com cisplatina e UNC1999. Os inibidores de β-catenina em monoterapia ou combinados com cisplatina e UNC1999 diminuíram o fenótipo tronco (stemness) das CTT+. Houve redução do crescimento tumoral após a administração de FH535, FH535+cisplatina e UNC1999+FH535, e diminuição dos marcadores β-catenina, EZH2, H3K27me3 e dos marcadores de células-tronco tumorais OCT4 e SOX2 no tecido tumoral. Através da imunoprecipitação da cromatina nas linhagens quimiorresistentes e nas populações de CTT- e CTT+, nós identificamos que EZH2 interage fortemente com a região promotora dos genes APC, FGF18 e VEGFA, e de forma menos intensa com os promotores de AXIN2, GSK3β e MMP7, aumentando a presença de H3K27me3, o que promove a repressão dos genes APC, GSK3β e VEGFA que participam da via de Wnt/β-catenina. Dessa forma, os resultados demonstram que β-catenina e EZH2 estão aumentados nas linhagens quimiorresistentes e na população de células-tronco tumorais, e a metilação de histonas participa de forma crítica, controlando a via de Wnt/β-catenina, através da inibição dos genes reguladores upstream APC e GSK3β, levando à translocaçãode β-catenina para o núcleo, onde se liga à fatores de transcrição e regula seus genes downstream como MMP7, participando da regulação das células-tronco tumorais. A administração de inibidores farmacológicos da via de Wnt/β-catenina e de EZH2 pode ser uma estratégia eficaz para o tratamento do carcinoma oral e eliminação das células-tronco tumorais
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2022
- Data da defesa: 12.09.2022
- Status:
- Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access)
- Versão do Documento:
- Versão publicada (Published version)
- Acessar versão aberta:
-
ABNT
MILAN, Thaís Moré. Controle epigenético da via de Wnt/β-catenina no acúmulo de células-tronco tumorais quimiorresistentes em carcinoma oral. 2022. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2022. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60140/tde-05102022-113323/. Acesso em: 01 abr. 2026. -
APA
Milan, T. M. (2022). Controle epigenético da via de Wnt/β-catenina no acúmulo de células-tronco tumorais quimiorresistentes em carcinoma oral (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60140/tde-05102022-113323/ -
NLM
Milan TM. Controle epigenético da via de Wnt/β-catenina no acúmulo de células-tronco tumorais quimiorresistentes em carcinoma oral [Internet]. 2022 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60140/tde-05102022-113323/ -
Vancouver
Milan TM. Controle epigenético da via de Wnt/β-catenina no acúmulo de células-tronco tumorais quimiorresistentes em carcinoma oral [Internet]. 2022 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60140/tde-05102022-113323/ - Controle epigenético da via de Wnt/β-catenina no acúmulo de células-tronco tumorais quimiorresistentes em carcinoma oral
- Efeito combinado de compostos de ação epigenética e cisplatina na eliminação de células tronco-tumorais de tumores quimioresistentes de cabeça e pescoço
- Desregulação da via de WNT/B-catenina e metilação de histonas participam do processo de quimiorresistência e acúmulo de Células-Tronco Tumorais (CTT) em carcinoma de cabeça e pescoço
- Identificação de NFKB em linhagens celulares de carcinoma oral resistentes a cisplatina e seu papel no acúmulo de células-tronco tumorais
- Using response surface methodology (RSM) to optimize 2G bioethanol production: a review
- Administração de epi-drogas para eliminar células-tronco tumorais e reverter a resistência à cisplatina
- Controle epigenético da resistência intrínseca e adquirida à cisplatina no câncer de cabeça e pescoço
- SET protein as an epigenetics target
- Epithelial–mesenchymal transition and cancer stem cells: a route to acquired cisplatin resistance through epigenetics in HNSCC
- Pharmacological inhibition of HDAC6 overcomes cisplatin chemoresistance by targeting cancer stem cells in oral squamous cell carcinoma
Informações sobre a disponibilidade de versões do artigo em acesso aberto coletadas automaticamente via oaDOI API (Unpaywall).
Por se tratar de integração com serviço externo, podem existir diferentes versões do trabalho (como preprints ou postprints), que podem diferir da versão publicada.
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
