Efeito de mutações no gene TrkA encontradas na insensibilidade à dor congênita sobre vias de sinalização celular (2020)
- Authors:
- Autor USP: MORAES, BEATRIZ CAROLINE DE - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- DOI: 10.11606/D.46.2020.tde-08112021-111904
- Subjects: DOR; MUTAÇÃO
- Keywords: CIPA; CIPA; Dor; Mutação; Mutation; NGF; NGF; Pain; PLCy; PLCy; TrkA; TrkA
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A insensibilidade congênita à dor e anidrose (CIPA), uma desordem genética autossômica recessiva, é caracterizada por episódios recorrentes de febre inexplicável, anidrose, retardo mental e principalmente pela falta de percepção da dor sensorial, devido à ausência de fibras sensitivas primárias dependentes de NGF e de neurônios simpáticos pós ganglionares. Mutações que causam perda de função do receptor de tropomiosina quinase A (TrkA) estão entre os principais fatores que levam à doença. O TrkA é um receptor de alta afinidade pelo NGF, e a formação do complexo NGF/TrkA tem papel no desenvolvimento neuronal, bem como na sensibilização para percepção de aumento de temperatura e de estímulo mecânico, que resulta em hiperalgesia. Muitas mutações compõem o espectro da síndrome da CIPA, entre elas, as localizadas no domínio quinase do TrkA são o alvo desse estudo, pois estas podem alterar o funcionamento da quinase e, assim, interferir em importantes vias de sinalização celular (PLCγ, Akt e ERK). Com o objetivo de compreender como as vias de sinalização são alteradas pelas mutações em TrkA na CIPA, através da análise de artigos publicados no PubMed, identificamos 131 mutações diferentes neste gene. As mutações missense foram localizadas na estrutura tridimensional e classificadas em três classes (1) mutações próximas ao local de ligação da ATP (sítio catalítico), (2) mutações no local de ligação ao substrato (SBS) e (3) mutações em outras regiões estruturadas do TrkA que poderiam impedir o enovelamento correto da proteína. Validamos in vitro uma das mutações de CIPA (R654C), classificada tanto como mutação no sítio deligação de ATP quanto na região de SBS. Como previsto nas modelagens, essa mutação apresentou inativação total da TrkA. As mutações nonsense e frameshift também afetariam significativamente a estrutura daTrkA, porém, embora algumas delas como Q770*, Q782*, V777Cfs*91 e L784Sfs*79, fariam com que uma proteína truncada fosse expressa afetando especificamente a ancoragem de PLCγ sua presença desencadeou o fenótipo de CIPA nos pacientes, indicando que a ativação de PLCγ seria uma importante via para a ocorrência da dor. Baseado nestes achados, foi desenvolvido um peptídeo que inibe a interação do TrkA e PLCγ, denominado QYP. Em células HEK 293 transfectadas com TrkA, QYP foi capaz inibir a ativação de PLCγ mediada por NGF. Ainda, em ensaios comportamentais in vivo de dor inflamatória aguda e crônica induzida por CFA, QYP foi capaz de inibir a hipersensibilidade mecânica e parcialmente a térmica causada pela inflamação por até 6 horas. QYP também se mostrou mais eficiente que inibidores comerciais (GNF,inibidor de TrkA e U73347,inibidor de PLC) na reversão da sensibilidade dolorosa. Com base nos nossos resultados, validamos que a via de PLCγ é essencial para o desenvolvimento de dor mecânica, sendo essa via um alvo em potencial para o desenvolvimento de novos analgésicos. Ainda, o peptídeo QYP mostrou-se efetivo na reversão da sensibilidade dolorosa aguda e crônica em modelos in vivo de dor inflamatória
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- Data da defesa: 10.09.2020
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- Cor do Acesso Aberto: gold
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-
ABNT
MORAES, Beatriz Caroline de. Efeito de mutações no gene TrkA encontradas na insensibilidade à dor congênita sobre vias de sinalização celular. 2020. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-08112021-111904/. Acesso em: 27 dez. 2025. -
APA
Moraes, B. C. de. (2020). Efeito de mutações no gene TrkA encontradas na insensibilidade à dor congênita sobre vias de sinalização celular (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-08112021-111904/ -
NLM
Moraes BC de. Efeito de mutações no gene TrkA encontradas na insensibilidade à dor congênita sobre vias de sinalização celular [Internet]. 2020 ;[citado 2025 dez. 27 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-08112021-111904/ -
Vancouver
Moraes BC de. Efeito de mutações no gene TrkA encontradas na insensibilidade à dor congênita sobre vias de sinalização celular [Internet]. 2020 ;[citado 2025 dez. 27 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-08112021-111904/ - Characterization of Akt activation mechanisms independent of growth factor stimulation
- Role of PLCg in experimental chronic pain hypersensitivity
- New analgesic lead developed based on analysis of mutations in patients with congenital insensitivity to pain
- Signaling pathways mediated by SH2‐containing proteins as a strategy for pain mitigation
- DNA methylation of the promoter region at the CREB1 binding site is a mechanism for the epigenetic regulation of brain-specific PKM zeta
- DNA methylation of the promoter region at the CREB1 binding site is a mechanism for the epigenetic regulation of brain-specific PKMζ
- PLCγ has a dual role in capsaicin-triggered neurogenic inflammation promoting mechanical hypersensitivity and edema in male mice
- Structural analysis of TrkA mutations in patients with congenital insensitivity to pain reveals PLCy as an analgesic drug target
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.46.2020.tde-08112021-111904 (Fonte: oaDOI API)
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