Análise do secretoma do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris: prospecção, expressão heteróloga e caracterizações biofísicas e bioquímicas de algumas enzimas (2019)
- Authors:
- Autor USP: MULINARI, EVANDRO JOSÉ - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FCI
- DOI: 10.11606/T.76.2020.tde-13052020-095131
- Subjects: FUNGOS TERMÓFILOS; BIOTECNOLOGIA; ENZIMAS; BIOMASSA
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: O desenvolvimento de enzimas que apresentam maior estabilidade térmica pode tornar o processo de hidrólise de biomassa mais econômico pelo aumento na taxa de hidrólise, diminuição da contaminação dos reatores e maior transferência de massa pela redução da viscosidade do meio. Dessa forma, foram conduzidos experimentos para prospecção e detecção de proteínas presentes no secretoma do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris cultivado em diferentes fontes de carbono: bagaço de cana-de-açúcar in natura (SCBIN), explodido à vapor (SCBSE) e polpa Kraft branqueada de eucalipto (BEKP), utilizando a técnica de LC-MS/MS. As análises mostraram uma hidrolase de glicosídeo da família 3 (GH3) como a maior constituinte do secretoma em BEKP e uma GH7 contendo módulo de ligação ao carboidrato da família 1 para SCBSE e SCBIN. O conteúdo proteico em SCBIN mostrou um repertório de hemicelulases que representaram 8% do total da contagem de espectros normalizados em comparação a 4% em BEKP e SCBSE, refletindo o efeito da composição da biomassa na regulação das proteínas secretadas. As análises também revelaram a presença de mecanismos oxidativos na degradação da biomassa. A primeira componente da análise de PCA das CAZymes revelou que SCBSE e SCBIN são correlacionados negativamente e que o SCBSE é caracterizado pela intensa remodelagem da parede celular, o que parece estar relacionado a intensa atividade secretória, indicando que o SCBSE possui potencial como meio de autoindução. Em contrapartida, retem muitas enzimas adsorvidas, o que pode ser não produtivo como matéria-prima para obtenção de monossacarídeos. A análise estatística apontou as enzimas diferencialmente secretadas no secretoma e que foram escolhidas para expressão heteróloga. As enzimas TtCel7.2 e TtCel7.3 secretadas em fungo filamentoso e as enzimas TtXil43, TtAraf54, Tex e TtGal5 expressas em bactéria exibiram temperatura ótima acima de 50 ºC epH ligeiramente ácido. TtCel7.2 e TtCel7.3 exibiram diferenças de atividade e estabilidade térmica com 80% de atividade após 3 horas de incubação à 65 ºC
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2019
- Data da defesa: 18.11.2019
- Status:
- Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access)
- Versão do Documento:
- Versão publicada (Published version)
- Acessar versão aberta:
-
ABNT
MULINARI, Evandro José. Análise do secretoma do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris: prospecção, expressão heteróloga e caracterizações biofísicas e bioquímicas de algumas enzimas. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2019. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-13052020-095131/. Acesso em: 01 abr. 2026. -
APA
Mulinari, E. J. (2019). Análise do secretoma do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris: prospecção, expressão heteróloga e caracterizações biofísicas e bioquímicas de algumas enzimas (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-13052020-095131/ -
NLM
Mulinari EJ. Análise do secretoma do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris: prospecção, expressão heteróloga e caracterizações biofísicas e bioquímicas de algumas enzimas [Internet]. 2019 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-13052020-095131/ -
Vancouver
Mulinari EJ. Análise do secretoma do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris: prospecção, expressão heteróloga e caracterizações biofísicas e bioquímicas de algumas enzimas [Internet]. 2019 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-13052020-095131/ - Expressão heteróloga em Aspergillus nidulans e caracterização bioquímica e estrutural de uma endoglucanase de Aspergillus terreus
- Clonagem e caracterização de enzimas identificadas no secretoma do fungo termofílico Thielavia terrestris
- Functional and structural characterization of an α-ʟ-arabinofuranosidase from Thermothielavioides terrestris and its exquisite domain-swapped β-propeller fold crystal packing
- Prospection, biophysical, and structural characterization of new carbohydrate-active enzymes with biotechnological applications
- Functional and structural characterisation of an α-L-arabinofuranosidase from Thielavia terrestris: the first β-propeller fold adopted through an exquisite domain-swapping in GH62 family
- Heterologous expression and functional characterization of a GH10 endoxylanase from Aspergillus fumigatus var. niveus with potential biotechnological application
- Functional characterization of a novel thermophilic exo-arabinanase from Thermothielavioides terrestris
- The use of synthetic biology tools in biorefineries to increase the building blocks diversification
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