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Inovação no processo de fracionamento de plasma humano através do uso de cromatografia líquida de pseudoafinidade (2016)

  • Authors:
  • Autor USP: FELICIANO, GABRIEL PINNA - BIOTECNOLOGIA
  • Unidade: BIOTECNOLOGIA
  • Subjects: PROTEINAS; PLASMA; ESPECTROMETRIA DE MASSA; CROMATOGRAFIA LÍQUIDA
  • Keywords: FVIII; FVIII; Liquid chromatography; Proteínas dependentes de vitamina K; Pseudo-affinity; Pseudoafinidade; Troca aniônica; Vitamin K dependent proteins; Anion-exchange; Cromatografia líquida; FIX; FIX
  • Language: Português
  • Abstract: Neste trabalho mostramos que o método de purificação empregando a coluna ANX Sepharose FF, alternando eluições com CaCl2 (pseudoafinidade) e NaCl, permite obter concentrados do complexo protrombínico e do fator VIII em uma etapa cromatográfica. Testamos as colunas ANX e Q Sepharose FF, monolito QA e membrana Sartobind Q e os tampões citrato, MES e Bis-Tris. Empregando a ANX Sepharose FF e o tampão citrato as proteínas do complexo protrombínico eluiram com CaCl2 25 mM e o FVIII com NaCl 500mM. A recuperação da atividade de FVIII foi de cerca de 60% e o fator de purificação de 220 vezes. Na fração contendo as proteínas do complexo protrombínico foram identificadas por espectrometria de massas a presença de fibrinogênio, proteína C4 do complemento e C4b Binding Protein. A análise das frações mostra que a presença destas proteínas não é devido à variação da concentração de CaCl2, possivelmente se deve à difusão lenta destas através da resina. Mais de 99% das proteínas do plasma não são adsorvidas na coluna e podem ser purificadas em etapas posteriores
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 27.10.2016
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      FELICIANO, Gabriel Pinna; AZEVEDO, Anita Mitico Tanaka; CHENG, Elisabeth. Inovação no processo de fracionamento de plasma humano através do uso de cromatografia líquida de pseudoafinidade. 2016.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2016. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-21022017-113927/ >.
    • APA

      Feliciano, G. P., Azevedo, A. M. T., & Cheng, E. (2016). Inovação no processo de fracionamento de plasma humano através do uso de cromatografia líquida de pseudoafinidade. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-21022017-113927/
    • NLM

      Feliciano GP, Azevedo AMT, Cheng E. Inovação no processo de fracionamento de plasma humano através do uso de cromatografia líquida de pseudoafinidade [Internet]. 2016 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-21022017-113927/
    • Vancouver

      Feliciano GP, Azevedo AMT, Cheng E. Inovação no processo de fracionamento de plasma humano através do uso de cromatografia líquida de pseudoafinidade [Internet]. 2016 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-21022017-113927/

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