Clonagem molecular, expressão, purificação e caracterização estrutural da endoglucanase de <i>Trichoderma harzianum</i> visando o desenvolvimento de coquetéis enzimáticos para a produção de etanol lignocelulósico (2016)
- Authors:
- USP affiliated author: PELLEGRINI, VANESSA DE OLIVEIRA ARNOLDI - IFSC
- School: IFSC
- Sigla do Departamento: FCI
- Subjects: TRICHODERMA; BIOMASSA; ENZIMAS
- Keywords: Biomass hydrolysis; Cellulases; Celulase; Endoglucanase; Endoglucanase; Etanol lignocelulósico; Hidrólise de biomassa; Lignocellulosic ethanol
- Language: Português
- Abstract: O aumento na demanda mundial por energia, a perspectiva de encolhimento dos recursos energéticos e a preocupação global com a questão ambiental, despertaram o interesse por fontes alternativas de energia. A biomassa lignocelulósica é abundante e de baixo custo, com potencial para complementar a produção em larga escala de combustíveis. A degradação das moléculas constituintes da parede celular à açúcares fermentescíveis e então à etanol, ocorre através da hidrólise enzimática da biomassa. Contudo, a utilização de enzimas para esse fim encontra-se em estágio exploratório e representa um gargalo na implementação de tecnologias de etanol 2G em escala industrial, desencadeando a busca de celulases bioquimicamente mais ativas, estáveis e economicamente viáveis. O presente trabalho visou a caracterização da endoglucanase I do fungo Trichoderma harzianum, e para isso foi realizada expressão, ensaios bioquímicos e biofísicos do domínio catalítico (ThCel7B-CCD) e da proteína inteira (ThCel7B-full). A enzima exibiu um perfil acidofílico, com atividade ótima em pH 3,0 a 55°C. A proteína também se mostrou capaz de hidrolisar uma variedade de substratos, sendo a maior atividade hidrolítica em β-glucano (75 U mg-1). Ao analisar a estabilidade térmica medida a 55°C em pH 5, a atividade residual manteve-se intacta por mais de 2 meses. Outra característica relevante foi o elevado grau de sinergismo entre ThCel7B e ThCel7A. Análises de microscopia eletrônica de flocos de aveiasubmetidas à hidrólise com ThCel7B evidenciaram os efeitos de degradação do substrato em relação às amostras controle. O conjunto desses resultados, além de importante para a compreensão do mecanismo molecular de ThCel7B e de outras endoglucanases da família GH7, também revelou uma enzima de interesse biotecnológicos uma vez que o comportamento ácido e sua estabilidade térmica são características relevantes para aplicações industriais sob condições extremamente ácidas
- Imprenta:
- Place of publication: São Carlos
- Date published: 2016
- Data da defesa: 09.03.2016
-
ABNT
PELLEGRINI, Vanessa de Oliveira Arnoldi; CAMILO, Cesar Moises; POLIKARPOV, Igor. Clonagem molecular, expressão, purificação e caracterização estrutural da endoglucanase de <i>Trichoderma harzianum</i> visando o desenvolvimento de coquetéis enzimáticos para a produção de etanol lignocelulósico. 2016.Universidade de São Paulo, São Carlos, 2016. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-11052016-140253/ >. -
APA
Pellegrini, V. de O. A., Camilo, C. M., & Polikarpov, I. (2016). Clonagem molecular, expressão, purificação e caracterização estrutural da endoglucanase de <i>Trichoderma harzianum</i> visando o desenvolvimento de coquetéis enzimáticos para a produção de etanol lignocelulósico. Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-11052016-140253/ -
NLM
Pellegrini V de OA, Camilo CM, Polikarpov I. Clonagem molecular, expressão, purificação e caracterização estrutural da endoglucanase de <i>Trichoderma harzianum</i> visando o desenvolvimento de coquetéis enzimáticos para a produção de etanol lignocelulósico [Internet]. 2016 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-11052016-140253/ -
Vancouver
Pellegrini V de OA, Camilo CM, Polikarpov I. Clonagem molecular, expressão, purificação e caracterização estrutural da endoglucanase de <i>Trichoderma harzianum</i> visando o desenvolvimento de coquetéis enzimáticos para a produção de etanol lignocelulósico [Internet]. 2016 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-11052016-140253/ - Clonagem molecular, expressão, purificação e caracterização estrutural da endoglucanase de <i>Trichoderma harzianum</i> visando o desenvolvimento de coquetéis enzimáticos para a produção de etanol lignocelulósico
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