Análise de células viáveis de Enterococcus faecalis utilizando Propídio Monoazida e PCR em Tempo Real (2015)
- Authors:
- Autor USP: PINHEIRO, ERICKA TAVARES - FO
- Unidade: FO
- Subjects: DNA; ENTEROCOCCUS
- Language: Português
- Abstract: Métodos moleculares baseados na detecção de fragmentos de DNA espécie-específicos apresentam inúmeras vantagens sobre os métodos de cultura. Entretanto, uma das suas desvantagens é a não diferenciação entre DNA de células viáveis e mortas. Para minimizar esse problema, foi desenvolvido um método para discriminar bactérias viáveis das mortas utilizando o corante Propídio Monoazida (PMA), que se intercala com o DNA de células mortas, impedindo sua amplificação nas reações de PCR. O objetivo desta investigação foi padronizar a utilização de PMA, em conjunto com qPCR na detecção e quantificação in vitro de Enterococcus faecalis. Três concentrações diferentes de PMA (10, 50 e 100 μM) foram adicionadas a suspensões de 10<sup > 6</sup> ufc/mL de células viáveis e mortas de E. faecalis. Após a extração do DNA, qPCR foi realizada usando iniciadores específicos para E. faecalis. Foram utilizados como controles positivos as suspensões bacterianas sem o tratamento com PMA. Quando comparado ao controle, o tratamento com PMA, nas diferentes concentrações, reduziu significantemente a amplificação do DNA de células mortas (p = 0,0079). A maior redução na quantificação de células mortas foi encontrada quando se utilizou o PMA na concentração de 100 µM (p = 0,0064). Concluímos que o método do tratamento de suspensões bacterianas com PMA na concentração de 100 µM, seguidas de análise por qPCR, foi eficaz para inibição da amplificação do DNA de células mortas, permitindo uma rápida detecção e quantificação de células viáveis de E. faecalis
- Imprenta:
- Source:
- Título: Brazilian Oral Resarch
- ISSN: 1806-8324
- Volume/Número/Paginação/Ano: v.29, supl. 1, p. 89, res. PI0055, 2015
- Conference titles: Reunião Anual SBPqO
-
ABNT
REIS, C. C et al. Análise de células viáveis de Enterococcus faecalis utilizando Propídio Monoazida e PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Resarch. São Paulo: Faculdade de Odontologia, Universidade de São Paulo. . Acesso em: 03 maio 2025. , 2015 -
APA
Reis, C. C., Pinheiro, E. T., Neves, V. D., & Mayer, M. P. A. (2015). Análise de células viáveis de Enterococcus faecalis utilizando Propídio Monoazida e PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Resarch. São Paulo: Faculdade de Odontologia, Universidade de São Paulo. -
NLM
Reis CC, Pinheiro ET, Neves VD, Mayer MPA. Análise de células viáveis de Enterococcus faecalis utilizando Propídio Monoazida e PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Resarch. 2015 ;29 89.[citado 2025 maio 03 ] -
Vancouver
Reis CC, Pinheiro ET, Neves VD, Mayer MPA. Análise de células viáveis de Enterococcus faecalis utilizando Propídio Monoazida e PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Resarch. 2015 ;29 89.[citado 2025 maio 03 ] - Identification of Fusobacterium nucleatum in primary and secondary endodontic infections and its association with clinical features by using two different methods
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