Análise de células viáveis de Actinomyces oris com Propídio Monoazida em PCR em Tempo Real (2024)
- Authors:
- Autor USP: PINHEIRO, ERICKA TAVARES - FO
- Unidade: FO
- Subjects: CÉLULAS MORTAS; CÉLULAS
- Language: Português
- Abstract: Os métodos moleculares baseados na detecção de fragmentos de DNA espécie-específicos apresentam inúmeras vantagens sobre os métodos de cultura. Entretanto, uma das suas desvantagens é a não diferenciação entre DNA de células viáveis e mortas. Para minimizar esse problema, um método foi desenvolvido para diferenciar bactérias viáveis das mortas utilizando o corante Propídio Monoazida (PMA) em associação com PCR quantitativo (qPCR). O PMA penetra em células com paredes danificadas e se intercala com o DNA, impedindo a sua amplificação. Entretanto, a eficácia desse método depende da espécie bacteriana e da concentração do PMA, entre outros fatores. Portanto, o objetivo deste estudo foi verificar a eficácia do método PMA-qPCR na quantificação seletiva de células viáveis de Actinomyces oris. Soluções de PMA na concentração de 100 µM foram adicionadas às suspensões de 106 unidades formadoras de colônia (UFC/mL) de células viáveis e mortas de A. oris. Foi realizada a extração de DNA das amostras e a reação de qPCR. Os dados das reações de PMA-qPCR de células mortas foram comparados aos controles com células vivas através do teste de Mann-Whitney (p< 0,05). Comparado ao controle, o uso do PMA promoveu uma redução na amplificação do DNA derivado de células mortas de aproximadamente 1 log10 (p< 0.05). Concluímos que o método do tratamento de suspensões bacterianas com PMA na concentração de 100 µM, seguidas de análise por qPCR, foi eficaz para inibição da amplificação do DNA de células mortas de A. oris. Porém, futuros estudos ainda são necessários para otimizar a eficácia do PMA-qPCR para essa espécie bacteriana
- Imprenta:
- Source:
- Título: Brazilian Oral Research
- ISSN: 1807-3107
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 38, supl. 1, res. Pla0026, 2024
- Conference titles: Proceedings of the SBPqO Annual Meeting
-
ABNT
SANTANA, I. P e PEREIRA, A. C. C e PINHEIRO, Ericka Tavares. Análise de células viáveis de Actinomyces oris com Propídio Monoazida em PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Research. São Paulo: SBPqO. . Acesso em: 26 dez. 2025. , 2024 -
APA
Santana, I. P., Pereira, A. C. C., & Pinheiro, E. T. (2024). Análise de células viáveis de Actinomyces oris com Propídio Monoazida em PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Research. São Paulo: SBPqO. -
NLM
Santana IP, Pereira ACC, Pinheiro ET. Análise de células viáveis de Actinomyces oris com Propídio Monoazida em PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Research. 2024 ; 38[citado 2025 dez. 26 ] -
Vancouver
Santana IP, Pereira ACC, Pinheiro ET. Análise de células viáveis de Actinomyces oris com Propídio Monoazida em PCR em Tempo Real. Brazilian Oral Research. 2024 ; 38[citado 2025 dez. 26 ] - Identification of Fusobacterium nucleatum in primary and secondary endodontic infections and its association with clinical features by using two different methods
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