Produção de fragmento recombinante de anticorpo em Pichia pastoris (2014)
- Authors:
- Autor USP: FEITOSA, VALKER ARAUJO - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBT
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; FARMÁCIA; LEVEDURAS; REATORES BIOQUÍMICOS
- Language: Português
- Abstract: Foram estudados a composição e o pH do meio de cultivo para a produção do fragmento de anticorpo (scFv) anti-LDL(-), expresso em Pichia pastoris recombinante. Os experimentos que definiram a composição e pH do meio assim como a concentração inicial de células na fase de indução foram realizados em agitador orbital a 250 rpm, com temperatura de 30 ºC na fase de crescimento e 20 ºC na fase de indução, durante 72 horas, com adição diária de 1% (v/v) de metanol. Para modificação do meio foi realizado um planejamento experimental empregando como variáveis independentes: extrato de soja, casaminoácidos e ureia, os quais substituíram o YNB e a biotina presentes no meio padrão (BMMY). Apesar de haver maior produção no meio com extrato de soja, o meio contendo 10 g.´LPOT.-1´ de casaminoácidos foi selecionado, uma vez que este favoreceu a etapa de purificação. A partir da faixa de pH estudada entre 3,0 e 8,0, determinou-se que o pH 8,0 no início da fase de indução favorece a maior produção. Finalmente, o meio BMMY-CA (pH 8,0) foi utilizado para cultivo em biorreator com volume de trabalho de 10L e a partir deste cultivo foram calculados os parâmetro cinéticos (velocidades de crescimento, de consumo de substrato e de produção, bem como produtividade). Diante do conjunto de experimentos realizados, foi possível otimizar a composição do meio de cultivo e as condições operacionais, que possibilitaram um aumento do rendimento bem como aumento do volume de produção do scFv anti-LDL(-) em biorreator
- Imprenta:
- Data da defesa: 28.03.2014
-
ABNT
FEITOSA, Valker Araujo. Produção de fragmento recombinante de anticorpo em Pichia pastoris. 2014. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-10062014-084638/. Acesso em: 27 dez. 2025. -
APA
Feitosa, V. A. (2014). Produção de fragmento recombinante de anticorpo em Pichia pastoris (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-10062014-084638/ -
NLM
Feitosa VA. Produção de fragmento recombinante de anticorpo em Pichia pastoris [Internet]. 2014 ;[citado 2025 dez. 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-10062014-084638/ -
Vancouver
Feitosa VA. Produção de fragmento recombinante de anticorpo em Pichia pastoris [Internet]. 2014 ;[citado 2025 dez. 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-10062014-084638/ - Incorporation of the antitumor drug miltefosine into polymeric micelles
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