Expressão da E3 ligase MuRF1 em cultura primária de fibroblastos de músculos esqueléticos (2013)
- Authors:
- Autor USP: MORISCOT, ANSELMO SIGARI - ICB
- Unidade: ICB
- Subjects: ANATOMIA; REAÇÂO EM CADEIA POR POLIMERASE; FIBROBLASTOS; SISTEMA MUSCULOESQUELETICO; REGENERAÇÃO (FENOMENOS BIOLÓGICOS); IMUNOFLUORESCÊNCIA
- Language: Português
- Abstract: Introdução Pesquisas recentes em nosso laboratório têm mostrado que a E3 ligase altamente expressa em músculo esquelético MuRF1 é importante para o processo de regeneração muscular e diferenciação de células satélites. Além disso, sabe-se que fibroblastos são capazes de se diferenciar em miotubos após serem transfectados com Myod, um importante fator de transcrição para a célula mioblástica. Ainda não se sabe se fibroblastos do tecido muscular esquelético são capazes de expressar MuRF1 e qual seria seu papel nessas células. Objetivos O objetivo do presente estudo foi avaliar se as células fibroblásticas provenientes de cultura primária de músculos esqueléticos são capazes de expressar a E3 ligase MuRF1. Métodos Todos os procedimentos foram aprovados pelo comitê de ética em experimentação animal (protocolo N•151). Músculos das patas traseiras foram removidos, digeridos em soluções com 0,3% de colagenase e 0,25% de tripisina. Após a digestão as células foram peletizadas e colocadas em suspensão em meio de cultura Dulbecco modified Eagle medium (DMEM) com antibióticos penicilina e estreptomicina a 1%, suplementado com 10% de soro fetal bovino. As células que não foram aderidas após 40 minutos de incubação foram removidas e os fibroblastos aderidos foram incubadas em estúfa úmida mantida a 37C• com 5% de CO2. Após 72h os fibroblastos foram removidos e passados para outra placa utilizando uma solução de 0,25% de tripisina. Todas as células usadas estavam terceira passagem. Imunomarcações foram realizadas para Miomezina, Pax7, alfa-actina, Myod, MuRF1 e MuRF2. Através de qPCR verificamos se os fibroblastos expressam o gene MuRF1.Resultados As análises por imunofluorescência revelaram que 100% dos fibroblastos apresentaram marcação para MuRF1, enquanto que apenas 17% eram positivas para Pax7. Não foram encontradas marcações para alfa-actina, MyoD, MuRF2 e Miomezina. As análises por qPCR revelaram que as células expressavam MuRF1 (MuRF1 = 28,74 ± 0,96 vs Colageno = 29,33 ± 1,11 p=0,47; n=5). Conclusão Os resultados sugerem que os fibroblastos provenientes de cultura primária de músculo esquelético são capazes de expressar a E3 ligase MuRF1.
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- Título: Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental (FeSBE)
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ABNT
SILVESTRE, J. G. O. et al. Expressão da E3 ligase MuRF1 em cultura primária de fibroblastos de músculos esqueléticos. 2013, Anais.. Caxambu: FeSBE, 2013. . Acesso em: 13 fev. 2026. -
APA
Silvestre, J. G. O., Baptista. I. L.,, Ramos, G. V., & Moriscot, A. S. (2013). Expressão da E3 ligase MuRF1 em cultura primária de fibroblastos de músculos esqueléticos. In Resumos. Caxambu: FeSBE. -
NLM
Silvestre JGO, Baptista. I. L., Ramos GV, Moriscot AS. Expressão da E3 ligase MuRF1 em cultura primária de fibroblastos de músculos esqueléticos. Resumos. 2013 ;[citado 2026 fev. 13 ] -
Vancouver
Silvestre JGO, Baptista. I. L., Ramos GV, Moriscot AS. Expressão da E3 ligase MuRF1 em cultura primária de fibroblastos de músculos esqueléticos. Resumos. 2013 ;[citado 2026 fev. 13 ] - Hipertrofia muscular
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