Papel da O-glicosilação com N-acetil-glucosamina (O-GlcNAc) no influxo e recaptação de cálcio pelo retículo sarcoplasmático em aorta de ratos: análise funcional (2013)
- Authors:
- Autor USP: ZANOTTO, CAMILA ZILIOTTO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RFA
- Subjects: FÁRMACOS (SISTEMA CARDIOVASCULAR); CÁLCIO; PROTEÍNAS; FARMACOLOGIA
- Keywords: Glicosilação; O-GlcNAc; Proteína cinase C; PugNAc; STIM1/Orai1; Calcium; Glycosylation; O-GlcNAc; Protein kinase C; Protein kinase C; STIM1/Orai1
- Language: Português
- Abstract: A O-glicosilação com N-acetil-glucosamina (O-GlcNAc) é uma modificação pós-translacional altamente dinâmica que modula diversas vias de sinalização. O processo de O-GlcNAc é controlado por duas enzimas: a enzima OGT é responsável por catalisar a adição de N-acetil-glucosamina no grupo hidroxila dos resíduos de serina e treonina, enquanto a OGA catalisa a remoção de O-GlcNAc das proteínas modificadas. Proteínas com importante papel na função vascular são alvo de O-GlcNAc e o aumento da expressão de proteínas modificadas por O-GlcNAc promove aumento da reatividade vascular para estímulos contráteis. Um dos mecanismos de extrema importância no controle do tônus vascular está ligado à regulação da concentração de cálcio (‘Ca POT. 2+’) intracelular, onde destacamos a participação do sistema STIM1/Orai1. As moléculas de interação estromal (STIM) atuam como sensores dos estoques intracelulares de ‘Ca POT. 2+’ e as proteínas Orai representam as subunidades que formam os canais de ‘Ca POT. 2+’ ativados pela liberação de ‘Ca POT. 2+’ (CRAC). Neste estudo investigamos a hipótese de que o aumento dos níveis vasculares de proteínas glicosiladas aumenta a resposta contrátil em aorta de ratos, por mecanismos relacionados ao controle da concentração intracelular de ‘Ca POT. 2+’. Em nossos experimentas, utilizamos aortas torácicas de ratos incubadas com PugNAc (inibidor seletivo da OGA, 100 ‘mü’M), por 24h. Utilizando protocolo experimental que permite avaliar contrações induzidas pelo influxo de ‘Ca POT. 2+’ e liberação de ‘Ca POT. 2+’ intracelular, demonstramos que a incubação com PugNAc aumentou a resposta contrátil à PE bem como a contração durante o período de influxo de ‘Ca POT. 2+’, induzida pela reintrodução de solução fisiológico contendo ‘Ca POT. 2+’ (1,56 mM). O bloqueio dos canais CRAC com 2-APB (100 ‘mü’M)e gadolíneo (‘Gd POT. 3+’, 100 ‘mü’M) diminuiu significativamente as contrações induzidas pelo influxo de ‘Ca POT. 2+’ em aortas incubadas com PugNAc. Além disso, estas aortas apresentaram aumento da expressão protéica de STIM1, o que resultaria em maior influxo de ‘Ca POT. 2+’. A contração induzida por cafeína (20 mM) e serotonina (10 ‘mü’M), a qual reflete a capacidade funcional do retículo sarcoplasmático (RS) em captar ‘Ca POT. 2+’, foi maior em aortas incubadas com PugNAc. O papel da ‘Ca POT. 2+’-ATPase (SERCA) foi avaliado com a utilização de tapsigargina, bloqueador da SERCA. O efeito da tapsigargina foi semelhante em artérias incubadas com PugNAc e veículo, apesar do aumento de expressão proteica da SERCA em aortas incubadas com PugNAc. Como a proteína cinase C (PKC) é ativada por aumentos de ‘Ca POT. 2+’ intracelular, determinamos se a atividade de proteínas alvo da PKC estavam aumentadas. A incubação com PugNAc aumentou a expressão das formas fosforiladas da CPI-17, MYPT-1 e MLC. Em conjunto, estes resultados sugerem que a ativação de STIM1/Orai1, aumento da liberação de ‘Ca POT. 2+’ intracelular e ativação da via de sinalização da PKC podem representar mecanismos que modulam as alterações vasculares em resposta ao aumento de proteínas glicosiladas por O-GlcNAc
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2013
- Data da defesa: 28.03.2013
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ABNT
ZANOTTO, Camila Ziliotto. Papel da O-glicosilação com N-acetil-glucosamina (O-GlcNAc) no influxo e recaptação de cálcio pelo retículo sarcoplasmático em aorta de ratos: análise funcional. 2013. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2013. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17133/tde-09092013-133940/. Acesso em: 04 set. 2024. -
APA
Zanotto, C. Z. (2013). Papel da O-glicosilação com N-acetil-glucosamina (O-GlcNAc) no influxo e recaptação de cálcio pelo retículo sarcoplasmático em aorta de ratos: análise funcional (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17133/tde-09092013-133940/ -
NLM
Zanotto CZ. Papel da O-glicosilação com N-acetil-glucosamina (O-GlcNAc) no influxo e recaptação de cálcio pelo retículo sarcoplasmático em aorta de ratos: análise funcional [Internet]. 2013 ;[citado 2024 set. 04 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17133/tde-09092013-133940/ -
Vancouver
Zanotto CZ. Papel da O-glicosilação com N-acetil-glucosamina (O-GlcNAc) no influxo e recaptação de cálcio pelo retículo sarcoplasmático em aorta de ratos: análise funcional [Internet]. 2013 ;[citado 2024 set. 04 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17133/tde-09092013-133940/
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