Avaliação da diluição do DNA extraído de material parafinado para amplificação em PCR (2010)
- Authors:
- USP affiliated author: NUNES, FABIO DAUMAS - FO
- School: FO
- Subjects: REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; CARCINOMA DE CÉLULAS ESCAMOSAS
- Language: Português
- Abstract: Introdução: Alguns fatores, como a presença de substâncias inibidoras e degradação do DNA, podem contribuir para afalha na detecção de genes, através da reação em cadeia da polimerase (PCR), a partir de DNA extraído de material parafinado. A diluição do DNAfrequentemente pode reduzir o número de ini- bidores e contaminantes e ainda assim conter DNA suficiente para a amplificação em PCR. Objetivo: Avaliar a influência da diluição de soluções de DNA extraído de material parafinado na amplificação por PCR do gene fJ-globina humana. Material e método: Foram utilizados 30 blocos parafinados de carcino- mas epidermoides de orofaringe referentes a pacien- tes-diagnosticados e tratados no Centro de Oncologia Bucal da FOA-UNESP A extração do DNAfoi reali- zada com o sistema QIAamp DNA minikit (Quiagen). O DNA obtido foi quantificado e avaliado quanto à pureza por espectrofotometria. Dois grupos foram formados com diferentes quantidades de DNA, sendo que o Grupo I foi constituído pelo DNA originalmente extraído e o Grupo 11 com o mesmo DNA, porém di- luído com adição de água ultrapura. Foi realizada a PCR utilizando-se oligonucleotídeos iniciadores para fJ-globina. Resultados: No Grupo 1,33,33% das amos- tras foram positivas para o gene fJ-globina, enquan- to no Grupo 11, 23,33% foram positivas. Conclusão: Neste estudo, a diluição do DNA extraído de material parafinado não alterou estatisticamente a quantidade de amostras positivas por PCR para o gene fJ-globina, embora os resultados obtidos sugiram que esta seja uma das formas de aumentar a eficácia do método de amplificação por PCR
- Imprenta:
- Source:
- Título do periódico: Revista da Pós-Graduação
- ISSN: 0104-5695
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 17, n. 1, p. 31-36, jan./mar., 2010
-
ABNT
KAWATA, Leandro Toyoji et al. Avaliação da diluição do DNA extraído de material parafinado para amplificação em PCR. Revista da Pós-Graduação, v. 17, n. ja/mar., p. 31-36, 2010Tradução . . Acesso em: 28 jun. 2022. -
APA
Kawata, L. T., Mattar, N. J., Garcia, J. F., Biasoli, E. R., Nunes, F. D., & Miyahara, G. I. (2010). Avaliação da diluição do DNA extraído de material parafinado para amplificação em PCR. Revista da Pós-Graduação, 17( ja/mar.), 31-36. -
NLM
Kawata LT, Mattar NJ, Garcia JF, Biasoli ER, Nunes FD, Miyahara GI. Avaliação da diluição do DNA extraído de material parafinado para amplificação em PCR. Revista da Pós-Graduação. 2010 ; 17( ja/mar.): 31-36.[citado 2022 jun. 28 ] -
Vancouver
Kawata LT, Mattar NJ, Garcia JF, Biasoli ER, Nunes FD, Miyahara GI. Avaliação da diluição do DNA extraído de material parafinado para amplificação em PCR. Revista da Pós-Graduação. 2010 ; 17( ja/mar.): 31-36.[citado 2022 jun. 28 ] - Immunolabelling of Langerhans cells differentiation markers and quantification of positive cells in Langerhans cells histiocytosis
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