Avaliação da levedura Saccharomyces cerevisiae como veículo vacinal contra a paracoccidioidomicose (2010)
- Authors:
- Autor USP: ASSIS, MARIANA APRIGIO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS; VACINAS (DESENVOLVIMENTO)
- Language: Português
- Abstract: A paracoccidioidomicose (PCM) é uma infecção fúngica endêmica na América Latina cujo agente causal é o fungo termodimórfico Paracoccidioides brasiliensis. O antígeno dominante da PCM é denominado gp43 que induz resposta imune protetora em camundongos vacinados. Apesar dos esforços recentes no estudo de antígenos vacinais para o tratamento e/ou prevenção dessa importante micose, urge o desenvolvimento de novas estratégias. Neste sentido utilizamos a levedura Saccharomyces cerevisiae como veículo vacinal contra a PCM. A vantagem desta levedura consiste no fato de que é um organismo não patogênico, facilmente manipulável geneticamente e com propriedades adjuvantes intrínsecas (beta-glucana da parede celular). Com o objetivo de avaliar a capacidade da levedura recombinante que expressa a gp43 em conferir proteção contra essa micose, cDNA da Gp43 foi clonado em vetares de expressão de S. cerevisiae. Após a indução da expressão com a adição de galactose ao meio de cultura, pudemos detectar a super-expressão de gp43 com anticorpo monoclonal anti-gp3 ou anti-HA em ensaios de Western blotting. A levedura recombinante que expressa a gp43 foi administrada profilaticamente via intraperitoneal em camundongos BALB/c que foram infectados endovenosamente com levedura de P. brasiliensis. Utilizamos dois grupos controle (1) camundongos inoculados com a levedura com o plasmídeo que não expressa a gp43, e (2) camundongos inoculados com PBS. Os camundongos foram mentidos por 30 dias para que a infecção se estabelecesse e, após este período, os animais foram sacrificados e os órgãos coletados (pulmão, baço e finado). A capacidade de infecção do fungo foi avaliada pela contagem das unidades formadoras de colônias (UFC) por grama de tecido dos órgãos de cada um dos animais vacinados e posteriormente infectados. Pulmões, baços e fígados dos grupos de camundongos inoculados com leveduras expressando ou não a gp43, apresentaramníveis reduzidos de unidades formadoras de colônias comparados com o grupo inoculado com PBS, o que indica um papel protetor de S. cerevisiae em infecção experimental. Os ensaios histológicos foram realizados para verificação do aspecto do tecido pulmonar no que se refere a manutenção dos septos alveolares e quantidade de granulomas formados. O pulmão dos camundongos do grupo vacina mostrou-se praticamente inalterado com pouca quantidade de granulomas. Análises de quantificação de citocinas foram realizadas. Camundongos do grupo vacina, que expressa gp43, produziram altos níveis de IL-12 e IFN-y e níveis reduzidos de IL-4 e IL-10. O conjunto de resultados indica que a vacina é capaz de elicitar uma resposta protetora do tipo Th1 contra a PCM
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2010
- Data da defesa: 03.12.2010
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ABNT
ASSIS, Mariana Aprigio. Avaliação da levedura Saccharomyces cerevisiae como veículo vacinal contra a paracoccidioidomicose. 2010. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. . Acesso em: 13 ago. 2024. -
APA
Assis, M. A. (2010). Avaliação da levedura Saccharomyces cerevisiae como veículo vacinal contra a paracoccidioidomicose (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Assis MA. Avaliação da levedura Saccharomyces cerevisiae como veículo vacinal contra a paracoccidioidomicose. 2010 ;[citado 2024 ago. 13 ] -
Vancouver
Assis MA. Avaliação da levedura Saccharomyces cerevisiae como veículo vacinal contra a paracoccidioidomicose. 2010 ;[citado 2024 ago. 13 ]
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