Receptor humano para Angiotensina II: clonagem, expressão e função (2007)
- Authors:
- Autor USP: SOUZA, MARIA OLIVEIRA DE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivo: Avaliar se o efeito da Angiotensina II (ANG II) sobre a atividade da isoforma 1 do trocador Na+/H+ (NHE1) está relacionado com a translocação do receptor AT1. Métodos e Resultados: Inicialmente, o DNA correspondente ao receptor AT1 foi extraído de células T84, derivadas de cólon humano (hAT1), pela técnica de RT-PCR. Em seguida, o hAT1 foi clonado no vetor de expressão pEGFP-N1 e após o seqüenciamento dos ácidos nucléicos, o recombinante fluorescente pEGFP-N1/hAT1 foi expresso estavelmente em células MDCK, derivadas de rim de cão, as quais já possuem AT1 e NHE1 endógenos. O deslocamento do receptor hAT1 foi investigado por microscopia confocal e western blot, utilizando anticorpo específico para GFP. A atividade do NHE1 foi avaliada por medidas de pHintracelular (pHi) através de microscopia de fluorescência, utilizando a sonda intracelular BCECF/AM e comparada entre grupos de células transfectadas e não transfectadas. Nossos resultados preliminares indicam sucesso no processo de expressão estável, uma vez que, análises de fluorescência revelam a presença de pEGFP-N1/hAT1 nas células MDCK. Os estudos funcionais mostram que, em células transfectadas com o recombinante pEGFP-N1/hAT1, a velocidade de extrusão celular de H+ (dpHi/dt) nos 2 primeiros minutos após o pulso ácido com NH4Cl, quando as células são expostas a uma solução controle é de [0.185 ± 0.015 (8) unidades de pH/min]. Na vigência de ANG (10-9M), a dpHi/dt é significantemente aumentada[0.309 ± 0.02 (5) unidades de pH/min]. Nesta condição, os estudos de fluorescência revelam alta expressão do recombinante na membrana celular. Conclusões: Nossos resultados indicam que em células MDCK, o efeito agudo da ANG II (10-9M) induz o aumento da atividade do NHE1 por interação do hormônio com os receptores AT1 expressos na membrana celular.
- Imprenta:
- Publisher: Federação de Sociedades de Biologia Experimental
- Publisher place: Águas de Lindóia
- Date published: 2007
- Source:
- Título: Programa e Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FESBE
-
ABNT
THIEME, Karina e OLIVEIRA-SOUZA, Maria. Receptor humano para Angiotensina II: clonagem, expressão e função. 2007, Anais.. Águas de Lindóia: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2007. . Acesso em: 02 abr. 2026. -
APA
Thieme, K., & Oliveira-Souza, M. (2007). Receptor humano para Angiotensina II: clonagem, expressão e função. In Programa e Resumos. Águas de Lindóia: Federação de Sociedades de Biologia Experimental. -
NLM
Thieme K, Oliveira-Souza M. Receptor humano para Angiotensina II: clonagem, expressão e função. Programa e Resumos. 2007 ;[citado 2026 abr. 02 ] -
Vancouver
Thieme K, Oliveira-Souza M. Receptor humano para Angiotensina II: clonagem, expressão e função. Programa e Resumos. 2007 ;[citado 2026 abr. 02 ] - Renal hemodynamic and morphological changes after 7 and 28 days of leptin treatment: the participation of angiotensin II via the AT1 receptor
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