Reconstituição de proteínas das formas amastigotas de Leishmania amazonensis em lipossomos e o seu uso na vacinação contra a leishmaniose cutânea experimental (2007)
- Authors:
- Autor USP: GONÇALVES, FABIANA RODRIGUES DOS SANTOS - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: LEISHMANIA; AMASTIGOTES; LIPOSSOMOS; VACINAÇÃO
- Language: Português
- Abstract: O objetivo deste trabalho foi investigar se proteolipossomos carregando proteínas de membrana da forma amastigota de L. amazonensis poderiam induzir uma imunidade protetora contra a leisbmaniose cutânea experimental. Como um passo preliminar para preparar os proteolipossomos, as amastigotas eram sonicadas e misturadas com diferentes detergentes. O SDS (dodecil sulfato de sódio) se mostrou mais eficiente do que os detergentes neutros ou zwiteriônicos em promover a solubilização das proteínas de membrana do parasita. O máximo de solubilização foi alcançado instantaneamente usando 0,5 mg/mL de proteína e 0,1 % de SDS. A melhor reconstituição das proteínas em lipossomos foi obtida usando DPPC (dipalmitoil fosfatidilcolina), DPPS (dipalmitoil fosfatidilserina) e colesterol na razão em massa de 5:1:4 e 0,5 mg/mL de proteína solubilizada. Esse protocolo gerou proteolipossomos com uma razão em massa de DPPC, DPPS e colesterol de 1:1:5. Para avaliar a imunidade protetora, os camundongos BALB/c eram vacinados pela via intraperitoneal com 10,20 ou 40µg de proteolipossomos e após três semanas eram desafiados na pata com '10 POT.6' promastigotas de L. amazonensis. A proteção foi avaliada durante 12 semanas, por meio da medida do tamanho das lesões causadas pelo parasita. Doze semanas após a infecção, os camundongos BALB/c imunizados com 10 ou 20 µg de proteolipossomos mostraram uma proteção de 25 e 35 %, respectivamente, quando comparados com os camundongos quereceberam tampão. Além disso, os camundongos imunizados com 40 µg de proteolipossomos apresentavam uma proteção de 69 % com 6 semanas de infecção e esse valor caiu para 50 % no [mal do experimento. Aumentando a concentração dos proteolipossomos e diminuindo o número de promastigotas no momento do desafio, o nível de proteção foi de 100 %. Essa proteção foi observada por 39 semanas nos camundongos BALB/c imunizados com 120 µg de proteolipossomos e desafiados com 104 promastigotas de L. amazonensis. Esses resultados indicam que a vacinação dos camundongos com os proteolipossomos induz uma imunidade protetora contra a L. amazonensis. Por outro lado, a vacinação com os proteolipossomos não protege camundongos C57BL/6 knock-out para interleucina-12 ou interferon-'gama'. Nossos resultados com os camundongos knock-out indicam que a proteção contra a L. amazonensis através da vacinação com os proteolipossomos é dependente de interleucina-12 e interferon-'gama'
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2007
- Data da defesa: 31.05.2007
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ABNT
GONÇALVES, Fabiana Rodrigues dos Santos. Reconstituição de proteínas das formas amastigotas de Leishmania amazonensis em lipossomos e o seu uso na vacinação contra a leishmaniose cutânea experimental. 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007. . Acesso em: 28 abr. 2025. -
APA
Gonçalves, F. R. dos S. (2007). Reconstituição de proteínas das formas amastigotas de Leishmania amazonensis em lipossomos e o seu uso na vacinação contra a leishmaniose cutânea experimental (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Gonçalves FR dos S. Reconstituição de proteínas das formas amastigotas de Leishmania amazonensis em lipossomos e o seu uso na vacinação contra a leishmaniose cutânea experimental. 2007 ;[citado 2025 abr. 28 ] -
Vancouver
Gonçalves FR dos S. Reconstituição de proteínas das formas amastigotas de Leishmania amazonensis em lipossomos e o seu uso na vacinação contra a leishmaniose cutânea experimental. 2007 ;[citado 2025 abr. 28 ]
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