Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura (2005)
- Authors:
- Autor USP: VICENTE, ELISABETE JOSE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivo: Construção de leveduras recombinantes que apresentem alta atividade de glicoamilase ancorada à superfície celular. Para que este objetivo seja atingido, será construída uma fusão gênica de um fragmento do gene FLO1 da levedura S. cerevisiae com o fragmento correspondente ao c-DNA da glicoamilase de Aspergillus awamori. Métodos e Resultados: O DNA genómico de S. cerevisiae S288C foi extraído e utilizado como molde para a amplificação por PCR do gene FLO1 correspondente aos fragmentos de diferentes tamanhos codificadores de Flop1p: FS(428 aa) primers (5 - aattctcgagcccgggatatcctagcaatggaacttctgtgatttct-3 ) e (5 - atgcgtcgacttaaataattgccagcaataaggacgcaatgaagac- 3 ) e FL(835 aa) primers (5 - ccgtctcgagcccgggaggctactattatccaatgaaggttgtttac-3 ) e (5 - atgcgtcgacttaaataattgccagcaataaggacgcaatgaagac- 3 ). Os produtos de PCR: FS e FL, foram clonados em pGEM-TEasy e a mistura de ligação foi empregada na transformação genética da linhagem DH5α de E. coli. A extração dos plasmídios hospedados em E. coli DH5α foi realizada a partir de 3 ml de culturaFoi feito uma digestão dos DNAs plasmidiais com a enzima de restrição EcoRI para liberar os insertos FS e FL clonados. A confirmação da construção foi realizada através de PCR dos plasmidios recombinantes utilizando-se os primers T7 e SP6, que flanqueiam a região de clonagem no vetor pGEMTEasy. Conclusão: Foi possível a clonagem dos fragmentos daregião C-terminal de Flo1p em E.coli DH5α, os quais serão usados na próxima etapa como âncoras para
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2005
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas
-
ABNT
FUENTES RIVERA, Jessica e VICENTE, Elisabete José. Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura. 2005, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2005. . Acesso em: 26 jan. 2026. -
APA
Fuentes Rivera, J., & Vicente, E. J. (2005). Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Fuentes Rivera J, Vicente EJ. Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura. Resumos. 2005 ;[citado 2026 jan. 26 ] -
Vancouver
Fuentes Rivera J, Vicente EJ. Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura. Resumos. 2005 ;[citado 2026 jan. 26 ] - Dosagem de etanol por rmn
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