Regulação da expressão do gene do GLUT4 pela atividade contrátil em músculo sóleo (2005)
- Authors:
- Autor USP: MACHADO, UBIRATAN FABRES - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Investigar se o aumento da expressão do mRNA do GLUT4 induzido pela contração muscular depende dos fatores transcricionais MEF2A, MEF2D e HIF1-a. Foram utilizados ratos Wistar de 2 meses, submetidos a um jejum de 48h. Logo apos os músculos sóleos foram retirados e incubados com tampão Krebs-Henseleit a 37°C. Depois de 40 minutos de incubação, o tampão foi trocado e o músculo direito foi estimulado eletricamente com estimulo supra-maximo por 10 segundos com intervalos de 50 segundos por 10 vezes. Apos a estimulação os músculos permaneceram no tampão por mais 20 minutos, e então foram estocados em freezer -70°C. Posteriormente foi retirado um extrato de proteínas nucleares dos tecidos com base no método descrito por ANDREWS e FALLER (1991). Para estudo do HIF1-a foi utilizado como sonda o oligonucleotideo Ebox, e para estudo dos MEF2A e MEF2D foi utilizado como sonda oligonucleotideo AT element. As sondas foram marcadas com P32- ATP.Na incubação, 15µg de proteínas nucleares foram adicionadas a 6µl de tampão de ligação, 1,5 µg de Poli dI-dC, 1µl de sonda marcada radioativamente, 4µl de sonda não marcada (apenas nos competidores) e água bidestilada autoclavada para completar o volume final para 15µl. Realizou-se então a eletroforese em gel de poliacrilamida. Após a eletroforese o gel foi transferido para uma folha de papel Whatman, secado a vácuo e exposto a um filme RX em cassete.Com a sonda Ebox, observou-se um aumento da ligação de 30% nos músculos estimulados.Já com a sonda AT-element, observouse um aumento da ligação de 50 % nos estimulados.O desaparecimento da sonda nos competidores demonstrou a especificidade dos oligonucleotideos. Os resultados apontam que houve uma maior capacidade de ligação de ligação dos MEF2 e do HIF1-a aos seus respectivos oligonucleotideos nos tecidos que sofreram o estimulo elétrico, indicando que estes fatores participam da regulação do GLUT4 induzida pela contração muscular
- Imprenta:
- Publisher: Federação de Sociedades de Biologia Experimental
- Publisher place: Águas de Lindóia, São Paulo
- Date published: 2005
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE
-
ABNT
LIMA, G. A. e GIANNOCCO, G. e MACHADO, Ubiratan Fabres. Regulação da expressão do gene do GLUT4 pela atividade contrátil em músculo sóleo. 2005, Anais.. Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2005. . Acesso em: 16 out. 2024. -
APA
Lima, G. A., Giannocco, G., & Machado, U. F. (2005). Regulação da expressão do gene do GLUT4 pela atividade contrátil em músculo sóleo. In Resumos. Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental. -
NLM
Lima GA, Giannocco G, Machado UF. Regulação da expressão do gene do GLUT4 pela atividade contrátil em músculo sóleo. Resumos. 2005 ;[citado 2024 out. 16 ] -
Vancouver
Lima GA, Giannocco G, Machado UF. Regulação da expressão do gene do GLUT4 pela atividade contrátil em músculo sóleo. Resumos. 2005 ;[citado 2024 out. 16 ] - High salt diet improves insulin sensitivity in pair-weight rats by increasing the glut, independently of leptin and TNF-'arroba' levels
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