Modulação da expressão gênica de células da leucemia promielocítica aguda induzida pelo ácido all-trans retinóico e pela tricostatina A. (2004)
- Authors:
- Autor USP: TEIXEIRA, HAMILTON LUIZ GIMENES - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RCM
- Subjects: EXPRESSÃO GÊNICA; LEUCEMIA; CLÍNICA GERAL
- Language: Português
- Abstract: A leucemia promielocítica aguda (LPA) é um subtipo distinto de leucemia mielóide aguda caracterizada por sua associação invariável com translocações envolvendo o receptor 'alfa' do ácido retinóico (RAR'alfa') localizado no cromossomo 17. Como conseqüência destas translocações, o gene RAR'alfa' pode ser fusionado aos genes PML, PLZF, NPM, NuMA ou STAT 5b (referidos com genes X) localizados nos cromossomos 15, 11, 5, 11 e 17, respectivamente. Na vasta maioria dos casos de LPA, a ancoproteína PML-RAR'alfa'. está envolvida, a qual atua como um repressor anormal da transcrição, através do recrutamento dos co-repressores nucleares (N-CoR) Sin3A e Sin3B e de histonas desacetilases (HDACs). O tratamento com o ácido all-trans retinóico (ATRA) é capaz de abolir a repressão aberrante na t(15;17)/PML-RAR'alfa', levando à remissão da leucemia. Entretanto, um terço dos casos de LPA irão recair, freqüentemente acompanhados pela resistência ao ATRA. Em tais casos, os inibidores das HDACs (HDACis), podem reverter a repressão aberrante da transcrição atuando diretamente nas HDACs e constituindo-se numa potencial alternativa terapêutica. Além do mais, é concebível que os HDACis apresentem efeitos sinérgicos com o ATRA. Todavia, os genes alvo do ATRA e da TSA não são conhecidos. Para determinar os efeitos celulares e transcripcionais dos HDACis e da sua associação com o ATRA, foram analisados o ciclo celular, apoptose e diferenciação granulocitária em células NB4 eem blastos leucêmicos da medula óssea de pacientes com LPA tratados in vitro com TSA, um potente HDACi, ATRA ou a associação ATRA + TSA. Além disso, também foi estudada a expressão diferencial de genes nas amostras tratadas in vitro com estas drogas através da metodologia de macroarrays. Para o ciclo celular, as células NB4 foram tratadas com ATRA '10 POT. -7'M, TSA 0,16µM, a associação entre ambos nas mesmas doses ou veículo (Controle) por 3, 5, 12, 24, 48 e 72 ... 72 horas, e a percentagem de células nas fases G0/G1, S e G2/M foram analisadas por citometria de fluxo nas células marcadas com iodeto de propídeo (PI). A indução da apoptose pelos mesmos tratamentos foi avaliada pela marcação com Anexina-V e PI e quantificada em citômetro de fluxo. A diferenciação das células NB4 foi analisada pela expressão do antígeno CD11b nas amostras tratadas por 72 horas com as drogas nas mesmas concentrações acima. Para as análises da expressão diferencial de genes, nós tratamos in vitro células NB4 e blastos leucêmicos de 16 pacientes com LPA por 5 horas como acima e o RNA total foi extraído, marcado e hidridado com membranas contendo 111 genes envolvidos na regulação do ciclo celular. Uma diminuição significativa na percentagem de células na fase S foi observada com 12 e 24 horas de cultura com os tratamentos com TSA e ATRA + TSA. Estes tratamentos também induziram a apoptose com 24 e 48 horas nestas células. Ao contrário, o tratamento com ATRAnão induziu apoptose ou inibição do ciclo celular. Por outro lado, este agente induziu a diferenciação granulocitária nas células NB4 tratadas por 72 horas. As análises de macroarray demonstraram que os tratamentos modularam a expressão de relativamente poucos genes em ambas as células. Além do mais, um número restrito de genes alvo foi comum aos tratamentos com ATRA e TSA. Principalmente, o tratamento com ATRA induziu a expressão tanto de células NB4 como os blastos leucêmicos, enquanto o tratamento com TSA reprimiu a expressão em células NB4 e atou como um indutor nas células primárias. Dentre os genes-alvo em comum ao ATRA e a TSA, foram detectados os genes GADD153, MAPKK2, replication protein A1 e jun-B nas células primárias e o ubiquitin C, beta actin e cyclin D2 nas células NB4
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2004
- Data da defesa: 19.04.2004
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ABNT
TEIXEIRA, Hamilton Luiz Gimenes. Modulação da expressão gênica de células da leucemia promielocítica aguda induzida pelo ácido all-trans retinóico e pela tricostatina A. 2004. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2004. . Acesso em: 09 nov. 2024. -
APA
Teixeira, H. L. G. (2004). Modulação da expressão gênica de células da leucemia promielocítica aguda induzida pelo ácido all-trans retinóico e pela tricostatina A. (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Teixeira HLG. Modulação da expressão gênica de células da leucemia promielocítica aguda induzida pelo ácido all-trans retinóico e pela tricostatina A. 2004 ;[citado 2024 nov. 09 ] -
Vancouver
Teixeira HLG. Modulação da expressão gênica de células da leucemia promielocítica aguda induzida pelo ácido all-trans retinóico e pela tricostatina A. 2004 ;[citado 2024 nov. 09 ]
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