Identificação das espécies de adenovírus isoladas de amostras clínicas por PCR-RFLP (2002)
- Authors:
- USP affiliated authors: MONEZI, TELMA ALVES - ICB ; HARSI, CHARLOTTE MARIANNA - ICB ; MEHNERT, DOLORES URSULA - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Os adenovírus humanos são classificados em seis espécies (A-F) com 51 sorotipos. A detecção dos adenovírus em amostras clínicas pode ser realizada por testes de IF, ELISA ou em cultura de células. A identificação dos adenovírus é realizada por neutralização ou análise de restrição do DNA viral.Um protocolo de PCR - RFLP, descrito por KIDD et alli (1996), usando primers para a região VA-RNA do genoma dos adenovírus, permite diferenciar as espécies. Alíquota do sobrenadante da cultura celular é suficiente para obtenção de um resultado sem necessidade da extração do DNA viral. Este método foi aplicado para identificação de adenovírus detectados em amostras clínicas (fezes e secreção de nasofaringe) e isoladas em culturas celulares. Para a reação de PCR foram utilizados os primers descritos por KIDD et alii (1996): VA6, VA3a e VA3b, sendo esta realizada em 40 ciclos na temperatura de pareamento à 47oC. Aspirados de nasofaringe foram coletados de crianças com infecções respiratórias. Nove dos 21 adenovírus isolados foram identificados como espécie B, 11 como C e uma amostra foi negativa. Nas amostras da espécie C o produto do PCR foi idêntico ao descrito por KIDD et alii (1996). Nas as amostras da espécie B, o produto da reação foi de 480pb e não 520pb como esperado e observado no protótipo da espécie, o sorotipo HAdV-3. Esta alteração foi observada nos isolados do genotipo HAdV-7 e parece ser característica deste genotipo. As espécies B e C detectadas nasamostras tiveram os seus resultados confirmados por neutralização. Amostras de fezes foram obtidas em um estudo prospectivo de gastrenterites infantis: 9 dos 17 adenovírus isolados foram identificados como espécie A; 5 como F e 2 como espécie C sendo estas duas co-infecção com espécie A e 2 amostras negativas. A reação de PCR para os adenovírus entéricos se mostrou mais sensível que a cultura celular ou reação de neutralização
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2002
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV
-
ABNT
ROBERTO, A F et al. Identificação das espécies de adenovírus isoladas de amostras clínicas por PCR-RFLP. 2002, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2002. . Acesso em: 14 nov. 2024. -
APA
Roberto, A. F., Santos, D. C., Moura, P. O., Monezi, T. A., Mehnert, D. U., & Hársi, C. M. (2002). Identificação das espécies de adenovírus isoladas de amostras clínicas por PCR-RFLP. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Roberto AF, Santos DC, Moura PO, Monezi TA, Mehnert DU, Hársi CM. Identificação das espécies de adenovírus isoladas de amostras clínicas por PCR-RFLP. Resumos. 2002 ;[citado 2024 nov. 14 ] -
Vancouver
Roberto AF, Santos DC, Moura PO, Monezi TA, Mehnert DU, Hársi CM. Identificação das espécies de adenovírus isoladas de amostras clínicas por PCR-RFLP. Resumos. 2002 ;[citado 2024 nov. 14 ] - Reduction of RT-PCR inhibitors from sewage by filtration through electropositive filter membrane
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