Análise de Redes Metabólicas em Saccharomyces cerevisiae (2001)
- Authors:
- USP affiliated author: GOMBERT, ANDREAS KAROLY - EP
- School: EP
- Sigla do Departamento: PQI
- Subjects: ENGENHARIA QUÍMICA; GLICOSE
- Language: Português
- Abstract: Análise de Redes Metabólicas foi aplicada à cepa de Saccharomyces cerevisiae CEN.PK113-7D, e a alguns mutantes interrompidos em genes que codificam para proteínas regulatórias envolvidas no fenômeno de repressão por glicose. Todas as cepas foram cultivadas em aerobiose, em meio mínimo contendo [1-13C]glicose como substrato limitante. As células eram recolhidas em situação de crescimento balanceado e submetidas à hidrólise, seguida de derivação e posterior injeção da amostra resultante num cromatógrafo gasoso acoplado a um espectrômetro de massa, para análise da marcação em alguns fragmentos de metabólitos intracelulares. Estes dados serviram como base para a identificação da atividade de algumas vias metabólicas no metabolismo central de S. cerevisiae. Além disto, utilizando-os juntamente com um modelo estequiométrico, foi possível obter uma estimativa para os fluxos no metabolismo central na cepa referência e nos mutantes estudados. Num primeiro momento, a metodologia foi validada para cultivos contínuos e descontínuos. Calculou-se um desvio padrão para a medida da marcação em cada fragmento de metabólito detectado pela metodologia empregada. Na cepa referência, observou-se que o ciclo de Krebs opera de forma cíclica em células que respiram e de forma não cíclica em células que apresentam metabolismo respiratório-fermentativo. Verificou-se que uma maior parte da glicose consumida é desviada para a via das pentoses fosfato no primeiro caso, em relação ao segundo.Foram encontradas evidências para a biossíntese de glicina através da enzima treonina aldolase e para a atividade da enzima málica. A ausência das proteínas Mig1 e Mig2 não altera os padrões de crescimento, produção de etanol e de marcação em metabólitos intracelulares de S. cerevisiae. Já a ausência de Hxk2, Reg1 ou Grr1 provoca alívio na repressão por glicose, observado pelo aumento das atividades respiratórias
- Imprenta:
- Data da defesa: 17.05.2001
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ABNT
GOMBERT, Andreas Karoly. Análise de Redes Metabólicas em Saccharomyces cerevisiae. 2001. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2001. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-09082001-155657/. Acesso em: 27 jun. 2022. -
APA
Gombert, A. K. (2001). Análise de Redes Metabólicas em Saccharomyces cerevisiae (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-09082001-155657/ -
NLM
Gombert AK. Análise de Redes Metabólicas em Saccharomyces cerevisiae [Internet]. 2001 ;[citado 2022 jun. 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-09082001-155657/ -
Vancouver
Gombert AK. Análise de Redes Metabólicas em Saccharomyces cerevisiae [Internet]. 2001 ;[citado 2022 jun. 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-09082001-155657/ - Selection of kluyveromyces strains for the production of heterologous proteins
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