Papel do regulador transcricional Fur na homeostase de ferro e identificação de seu regulon em Caulobacter crescentus (2008)
- Authors:
- Autor USP: MARQUES, MARILIS DO VALLE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A manutenção de níveis fisiológicos adequados de ferro requer a existência de sistemas eficientes de captação, dado sua escassa disponibilidade, e mecanismos que evitem seu acúmulo, devido seu potencial de gerar espécies reativas de oxigênio. Em bactérias, o repressor transcricional Fur desempenha papel fundamental neste processo. Caulobacter crescentus, uma alfa-proteobactéria, Gram-negativa possui em seu genoma um grande número de genes potencialmente envolvidos em captação e regulação da homeostase deste metal. O gene fur (CC0057) foi deletado do genoma da linhagem selvagem NA1000 por troca alélica e a linhagem mutante nula mostrou defeito no crescimento durante fase exponencial. A linhagem mutante fur também mostrou maior susceptibilidade a estresse oxidativo gerado por peróxido de hidrogênio em relação à linhagem NA1000, tanto em fase exponencial quanto em fase estacionária de crescimento, como verificado por ensaio de halo de inibição de crescimento. Estes dois fenótipos foram complementados em trans pelo gene fur clonado em um vetor de poucas cópias. Para identificar membros do regulon Fur foi realizada uma busca in silico nas regiões intergênicas do genoma completo de C. crescentus, utilizando uma matriz derivada de seqüências Fur box de outras bactérias. Foram preditos sítios regulatórios de Fur na região promotora de genes associados a diversas funções celulares, como sistemas de aquisição de ferro (vários receptores dependentes de TonB, o sistemade transporte de Fe(II)), transportadores do tipo ABC, reguladores transcricionais, sistemas de transdução de sinal e enzimas que utilizam ferro como co-fator que fazem parte de importantes vias metabólicas, como ciclo de Krebs e cadeia de transporte de elétrons. ) A validação de três destes sítios Fur box preditos, localizados na região promotora dos genes CC2194, CC0177 e CC3529, que codificam um receptor dependente de TonB, um sistema de transporte de Fe(II) e a enzima succinato desidrogenase, respectivamente, foi realizada através da análise da expressão destes genes por ensaio de atividade de beta-galactosidase. Os genes CC2194 e CC0711 foram induzidos em carência de ferro (100 µM de 2,2' dipiridil) na linhagem NA1000 e mostraram-se desreprimidos no mutante fur, enquanto o gene CC3529 foi mais expresso em suficiência de ferro (100 µM de FeSO4) na linhagem NA1000 e teve redução de sua expressão no mutante fur. Estes resultados confirmam o papel de Fur como repressor de genes de captação de ferro e seu papel positivo na regulação da expressão de genes que codificam proteínas que estocam ou utilizam ferro como co-fator. Portanto, os dados obtidos até agora apontam para um papel importante de Fur não apenas na regulação de sistemas envolvidos na captação de ferro, mas também nos mecanismos utilizados por C. crescentus para controlar os níveis intracelulares de ferro, evitando a formação de espécies reativas de oxigênio.
- Imprenta:
- Publisher: Sociedade Brasileira de Genética
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2008
- Source:
- Título do periódico: Programa
- Conference titles: Congresso Brasileiro de Genética
-
ABNT
DA SILVA NETO, J. F. e MARQUES, Marilis do Valle. Papel do regulador transcricional Fur na homeostase de ferro e identificação de seu regulon em Caulobacter crescentus. 2008, Anais.. Ribeirão Preto: Sociedade Brasileira de Genética, 2008. . Acesso em: 25 set. 2024. -
APA
Da Silva Neto, J. F., & Marques, M. do V. (2008). Papel do regulador transcricional Fur na homeostase de ferro e identificação de seu regulon em Caulobacter crescentus. In Programa. Ribeirão Preto: Sociedade Brasileira de Genética. -
NLM
Da Silva Neto JF, Marques M do V. Papel do regulador transcricional Fur na homeostase de ferro e identificação de seu regulon em Caulobacter crescentus. Programa. 2008 ;[citado 2024 set. 25 ] -
Vancouver
Da Silva Neto JF, Marques M do V. Papel do regulador transcricional Fur na homeostase de ferro e identificação de seu regulon em Caulobacter crescentus. Programa. 2008 ;[citado 2024 set. 25 ] - Estudo da participação da proteína Rho na regulação do estresse oxidativo mediado por KatG em Caulobacter crescentus
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