Utilização do sistema nucleolink para amplificação e detecção do virus da imunodeficiência humana (HIV-1) (2001)
- Authors:
- Autor USP: GOUVEA, CELSO JOSE - BIOTECNOL
- Unidade: BIOTECNOL
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; HIV; ÁCIDOS NUCLEICOS
- Language: Português
- Abstract: Neste estudo, é descrito um novo sistema de amplificação e detecção deste vírus, em um único tubo, utilizando o sistema Nucleolink. O DNA proviral foi extraído de PBMC, utilizando o kit da QIAGEN. As placas do Nucleolink (Nunc) foram sensibilizadas com uma sonda complementar ao gene gag, com uma cauda poli T. O DNA foi amplificado por PCR nos poços da microplaca, utilizando iniciadores específicas ao gene gag. A detecção foi realizada, utilizando uma sonda biotinilada e peroxidase (HRP) conjugada à estreptavidina ,como cojugado. Amostras de 60 pacientes foram previamente analizadas, utilizando o kit HIV-1 Nuclisens (Organon Teknika), 30 amostras positivas e 30 negativas foram analizadas com este sistema. Das 30 amostras positivas, 29 foram também positivas com este novo sistema, enquanto que todas as 30 amostras negativas, tiveram o mesmo resultado com o Sistema Nucleolink. Os resultados demonstraram um potencial do uso do Sistema Nucleolink para a detecção dos ácidos nucléicos viral em amostras clínicas, utilizando um método rápido e fácil (aproximadamente 7 horas, incluindo 4 horas para a sensibilização das placas com a sonda)
- Imprenta:
- Data da defesa: 07.12.2001
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ABNT
GOUVEA, Celso José. Utilização do sistema nucleolink para amplificação e detecção do virus da imunodeficiência humana (HIV-1). 2001. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2001. . Acesso em: 26 abr. 2024. -
APA
Gouvea, C. J. (2001). Utilização do sistema nucleolink para amplificação e detecção do virus da imunodeficiência humana (HIV-1) (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Gouvea CJ. Utilização do sistema nucleolink para amplificação e detecção do virus da imunodeficiência humana (HIV-1). 2001 ;[citado 2024 abr. 26 ] -
Vancouver
Gouvea CJ. Utilização do sistema nucleolink para amplificação e detecção do virus da imunodeficiência humana (HIV-1). 2001 ;[citado 2024 abr. 26 ]
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