Isolamento do trímero e suas subunidades a, b e c da hemoglobina de Glossoscolex paulistus e caracterização por análise de aminoácidos (2001)
- Authors:
- Autor USP: FERNANDEZ, SANDRA REGINA PEREZ DIAS - IQSC
- Unidade: IQSC
- Subjects: BIOFÍSICA; PROTEÍNAS
- Language: Português
- Abstract: A hemoglobina extracelular de Glossoscolex paulistus tem propriedades similares às hemoglobinas de outros anelídeos, com uma massa molecular próxima de 3 MDa e estrutura oligomérica na forma de bicamada hexagonal. Foi realizado o estudo da dissociação da hemoglobina de Glossoscolex paulistus em função do pH, no intervalo de pH 7,0 a 9,0. Observou-se que até o pH 8,7 ainda aparece uma fração de proteína íntegra, não dissociada. A pH 9,0 ocorre a completa dissociação em dímero de tetrâmero '(abcd) IND. 2', trímero (T), monômero (d) e "linkers" (L). Através da caracterização das frações por SDS-PAGE, pode-se observar que as frações da hemoglobina dissociada, trímero e (abcd)2, ainda apresentam uma pequena quantidade de "linkers", não sendo possível isolar o trímero puro, ou seja, isento de "linkers". Através da cromatografia de alta eficiência em fase reversa (RP-HPLC) obteve-se o trímero e seus monômeros (a, b e c) puros, na forma apo. A análise de aminoácidos mostrou uma composição de resíduos muito próxima da hemoglobina do anelídeo Lumbricus terrestris e observou-se a prevalência de resíduos hidrofílicos. Foi determinado através de degradação de Edman o terminal amínico de um dos monômeros do trímero. Foi possível determinar 20 resíduos e a sequência apresentou 55% de identidade sequencial parcial com a cadeia b do trímero do anelídeo Lumbricus terrestris, superior às identidades observadas para a cadeia a (20%) e para a cadeia c (19%).Concluímos, portanto, que o pico 1 da RP-HPLC deve corresponder à cadeia b no trímero do Glossoscolex paulistus
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2001
- Data da defesa: 13.06.2001
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ABNT
FERNANDEZ, Sandra Perez. Isolamento do trímero e suas subunidades a, b e c da hemoglobina de Glossoscolex paulistus e caracterização por análise de aminoácidos. 2001. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2001. . Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Fernandez, S. P. (2001). Isolamento do trímero e suas subunidades a, b e c da hemoglobina de Glossoscolex paulistus e caracterização por análise de aminoácidos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Carlos. -
NLM
Fernandez SP. Isolamento do trímero e suas subunidades a, b e c da hemoglobina de Glossoscolex paulistus e caracterização por análise de aminoácidos. 2001 ;[citado 2024 mar. 28 ] -
Vancouver
Fernandez SP. Isolamento do trímero e suas subunidades a, b e c da hemoglobina de Glossoscolex paulistus e caracterização por análise de aminoácidos. 2001 ;[citado 2024 mar. 28 ]
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