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Preparação, caracterização e atividade citotóxica diferencial de nanopartículas de Gramicidina D (2025)

  • Authors:
  • Autor USP: SILVA, RICARDO MÁRCIO E - IQ
  • Unidade: IQ
  • DOI: 10.11606/D.46.2025.tde-28012026-172556
  • Subjects: BIOQUÍMICA; NANOPARTÍCULAS; PEPTÍDEOS; ANTIBIÓTICOS
  • Keywords: Antimicrobial peptides; Citotoxicidade diferencial; Differential cytotoxicity; Dynamic light scattering; Espalhamento dinâmico de luz; Gramicidin; Gramicidina; Nanoparticles; Nanopartículas; Peptídeos antimicrobianos
  • Agências de fomento:
  • Language: Português
  • Abstract: A gramicidina D é uma mistura natural de peptídeos de canal A-C com pequenas diferenças na estrutura química, capazes de atravessar membranas celulares como dímeros. Esses canais de gramicidina (Gr) permitem a difusão de cátions, afetando o balanço iônico usual das células. A atividade microbicida de Gr em diferentes formulações, como vesículas ou discos de bicamada, bicamadas suportadas em sílica ou nanopartículas de poliestireno, foi descrita anteriormente por nosso laboratório e resultou dependente da formulação. A descrição preliminar de dispersões aquosas de gramicidina em forma de nanopartículas (NPs) mostrou que as mesmas eram mais efetivas do que as outras formulações mencionadas. Com o presente trabalho, damos continuidade à caracterização dessas dispersões coloidais de Gr em solução aquosa por diversos métodos: turbidimetria, espalhamento dinâmico de luz, avaliação da dependência do espalhamento de luz pelas dispersões em função do comprimento de onda da luz incidente e obediência à Lei de Rayleigh, determinação do potencial Zeta e polidispersidade das nanopartículas em dispersão. Para determinação analítica das concentrações de Gr nas dispersões foi utilizada espectrofotometria.A absorbância do peptídeo em metanol e trifluoretanol seguiu a Lei de Lambert-Beer mostrando dependência linear com a concentração do peptídeo. Quanto ao espalhamento de luz pelas dispersões aquosas de Gr houve a obtenção de excelente acordo com a Lei de Rayleigh tal que houve uma dependência linear da absorbância derivada do espalhamento com o inverso do comprimento de onda da luz incidente elevado à quarta potência. As NPs de Gr afetaram a viabilidade de cinco diferentes linhagens de células de mamíferos em cultura em uma faixa de concentrações de Gr que variou entre 0,5 e 5,0 µM. A análise dos dados de viabilidade celular foi feita por determinações de concentração de Gr que mata 50% das células viáveis (IC50). Partindo-se de 1,5×10⁴ células por poço em microplacas de 96 poços, adicionou-se NPs de Gr que interagiram com as células por 24h para então se determinar a viabilidade celular pelo método do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil-2Htetrazólio (MTT). A viabilidade celular foi plotada em função da concentração de Gr para obtenção de IC50. Os valores de IC50 variaram entre 1 e 5 µM de Gr, não ocorrendo grandes diferenças para células normais ou transformadas.Por outro lado, comparando com a viabilidade celular de microrganismos como: Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candida albicans, ocorreu perda total de viabilidade celular para os dois últimos micróbios a partir de 10⁷ CFU/mL. As NPs de Gr praticamente não tiveram efeito sobre Escherichia coli. Assim, a citotoxicidade diferencial das NPs de Gr é inferida a partir da comparação entre os efeitos na viabilidade celular de células de mamífero em cultura e contra os micróbios. Os resultados sugerem que a formulação simples e eficaz de nanopartículas de gramicidina obtida diretamente da autoassociação de moléculas de Gr em solução aquosa merece ser mais explorada, visando aplicações biomédicas das NPs de Gr in vivo contra doenças infecciosas e cânceres.
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 12.12.2025
  • Acesso à fonteAcesso à fonteDOI
    Informações sobre o DOI: 10.11606/D.46.2025.tde-28012026-172556 (Fonte: oaDOI API)
    • Este periódico é de acesso aberto
    • Este artigo NÃO é de acesso aberto

    How to cite
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    • ABNT

      SILVA, Ricardo Márcio e. Preparação, caracterização e atividade citotóxica diferencial de nanopartículas de Gramicidina D. 2025. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2025. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-28012026-172556/. Acesso em: 01 mar. 2026.
    • APA

      Silva, R. M. e. (2025). Preparação, caracterização e atividade citotóxica diferencial de nanopartículas de Gramicidina D (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-28012026-172556/
    • NLM

      Silva RM e. Preparação, caracterização e atividade citotóxica diferencial de nanopartículas de Gramicidina D [Internet]. 2025 ;[citado 2026 mar. 01 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-28012026-172556/
    • Vancouver

      Silva RM e. Preparação, caracterização e atividade citotóxica diferencial de nanopartículas de Gramicidina D [Internet]. 2025 ;[citado 2026 mar. 01 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-28012026-172556/

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