Caracterização estrutural da Fábrica Viral de Mimivirus por meio de técnicas de Imageamento de Raios X Síncrotron (2025)
- Authors:
- Autor USP: DELFINO, LEONARDO MARTINS - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FCM
- DOI: 10.11606/D.76.2025.tde-14012026-105757
- Subjects: AMOEBA; VÍRUS; DIVERSIDADE GENÉTICA
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A presente dissertação investiga a organização estrutural de células de Acanthamoeba castellanii e suas interações com vírus gigantes, com ênfase no Niemeyer Vírus e dados preliminares do Tupanvirus, empregando abordagens de imageamento multitécnicas baseadas em radiação síncrotron. O trabalho teve como objetivos principais caracterizar a formação e a dinâmica das fábricas virais durante o ciclo replicativo desses vírus e desenvolver protocolos para a aplicação de técnicas avançadas de tomografia em amostras biológicas. Para tal, culturas clonais de A. castellanii foram estabelecidas, reduzindo a heterogeneidade dos ensaios, e submetidas a infecção controlada pelos vírus. As amostras foram preparadas para experimentos de Tomografia Computadorizada Ptychográfica de Raios X (PXCT), conduzidos na linha de luz Cateretê do síncrotron Sirius/ LNLS, e para Crio-Tomografia de Raios X Mole (Cryo-SXT), realizados na linha MISTRAL do síncrotron ALBA. Protocolos de fixação, vitrificação, secagem em ponto crítico e contrastação com tetróxido de ósmio foram otimizados para preservar a integridade estrutural celular. Os resultados mostraram que a PXCT possibilitou a reconstrução tridimensional de trofozoítos controles e infectados, revelando alterações morfológicas significativas associadas ao efeito citopático viral, incluindo redistribuição de vacúolos e mitocôndrias. A análise de Cryo-SXT, por sua vez, permitiu visualizar fábricas virais em estado quase nativo, evidenciando compartimentalização funcional entre regiões de replicação e montagem de vírions. Segmentações manuais e assistidas por inteligência artificial em softwares especializados (Avizo, Amira e Dragonfly) corroborara para essas observações, demonstrando o potencial das técnicas em destacar organelas e estruturas virais em volumes inteiros de células. A integração dos doismétodos revelou-se complementar, sendo a PXCT mais adequada para análises quantitativas em profundidade e a Cryo-SXT para visualização de estruturas nativas com alto contraste. Conclui-se que a combinação de abordagens baseadas em raios X coerentes e moles amplia as possibilidades de estudo da virologia estrutural, contribuindo para a compreensão da biologia dos vírus gigantes e para o desenvolvimento de novas metodologias em bioimagem tridimensional.
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2025
- Data da defesa: 29.10.2025
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo NÃO é de acesso aberto
-
ABNT
DELFINO, Leonardo Martins. Caracterização estrutural da Fábrica Viral de Mimivirus por meio de técnicas de Imageamento de Raios X Síncrotron. 2025. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2025. Disponível em: https://doi.org/10.11606/D.76.2025.tde-14012026-105757. Acesso em: 14 fev. 2026. -
APA
Delfino, L. M. (2025). Caracterização estrutural da Fábrica Viral de Mimivirus por meio de técnicas de Imageamento de Raios X Síncrotron (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de https://doi.org/10.11606/D.76.2025.tde-14012026-105757 -
NLM
Delfino LM. Caracterização estrutural da Fábrica Viral de Mimivirus por meio de técnicas de Imageamento de Raios X Síncrotron [Internet]. 2025 ;[citado 2026 fev. 14 ] Available from: https://doi.org/10.11606/D.76.2025.tde-14012026-105757 -
Vancouver
Delfino LM. Caracterização estrutural da Fábrica Viral de Mimivirus por meio de técnicas de Imageamento de Raios X Síncrotron [Internet]. 2025 ;[citado 2026 fev. 14 ] Available from: https://doi.org/10.11606/D.76.2025.tde-14012026-105757 - Synchrotron light: can it help my research?
- The viral factory of Nucleocytoviricota (giant-viruses) and their peculiarities
- Novas técnicas biofísicas de biologia estrutural aplicadas em vírus gigantes de Acanthamoeba castellanii
- Integration of synchrotron techniques for the analysis of cellular ultrastructures in Acanthamoeba castellanii induced by the Niemeyer Virus
- Structural characterization of the Mimivirus viral factory through X-ray imaging techniques
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.76.2025.tde-14012026-105757 (Fonte: oaDOI API)
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
