Interação entre Myd88 e a glicosilação de proteínas: um elo perdido (2025)
- Authors:
- Autor USP: MARQUES NETO, ANTONIO MOREIRA - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMP
- DOI: 10.11606/T.42.2025.tde-18122025-162800
- Subjects: PARASITOLOGIA; GLICOPROTEÍNAS; MONOSSACARÍDEOS; AÇUCARES; PROTEÍNAS DA MEMBRANA; CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA; PROTEÍNAS; INTERLEUCINA 1
- Keywords: Ácidos siálicos; Analytical methods; Glicosilação; Glycosylation; HPLC; HPLC; Métodos analíticos; MLEC; MLEC; MyD88; MyD88; Sialic acids
- Language: Português
- Abstract: A proteína de resposta primária à diferenciação mieloide 88 (MYD88) é uma proteína adaptadora relacionada ao processo inflamatório, mais precisamente à resposta imune inata. Sua função está associada a receptores moleculares do tipo Toll-like (TLRs) e IL-1 (IL-1R), envolvidos no reconhecimento de padrões moleculares relacionados a patógenos e tecidos danificados, além da ativação do fator de transcrição NFkB (nuclear factor-kappa B), quinases ativadas por mitógenos e proteína ativadora 1. Os TLRs passam por uma variedade de modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, ubiquitinação e processamento proteolítico, que regulam seu tráfego, ligação a ligantes, conformação e ativação da via de sinalização. A glicosilação de proteínas é uma modificação pós-traducional amplamente distribuída e envolvida em diversos processos celulares, como adesão célula-célula e célula-matriz extracelular, dobramento de proteínas, reconhecimento de anticorpos, solubilidade e degradação de proteínas, desempenhando um papel central na resposta imune e na interação hospedeiro-parasita, entre outros. A parte mais exposta das glicoproteínas é composta por ácidos siálicos, que são fundamentais na comunicação celular, incluindo a relação hospedeiropatógeno. Esta tese está dividida em duas partes. Na primeira parte, comparamos diferentes abordagens para identificar e quantificar ácidos siálicos em diversas matrizes biológicas (plasma, urina, saliva e tecido cerebral), utilizando dois sistemas de HPLC (HPLC-FLD e HPAE-PAD) e diferentes métodos de preparo de amostras (imobilização em PVDF e hidrólise ácida direta) para observar diferentes padrões de sialilação em células estimuladas com LPS e poly(I:C).Os resultados mostraram que a derivatização de ácidos siálicos com DMB e a imobilização de proteínas em membrana de PVDF foi a melhor abordagem para identificação e quantificação dos ácidos siálicos. Na segunda parte, analisamos as alterações na glicosilação de proteínas após a ativação de duas vias distintas dos TLRs. Neste contexto, células THP-1 são modelos experimentais interessantes para estudar processos inflamatórios complexos. A estimulação dessas células com diferentes PAMPs permitiu examinar os processos inflamatórios a partir de vias distintas individualmente. Utilizando LPS e poly(I:C), ativamos dois tipos de vias de sinalização, possibilitando a compreensão das diferenças entre as vias dependentes e independentes de MyD88, respectivamente. Os resultados obtidos por HPLC, 14 Lectin Blotting e glicômica direcionada por espectrometria de massas corroboram os achados da análise quantitativa do proteoma em larga escala. As proteínas MLEC e OST, envolvidas nas etapas iniciais da glicosilação, foram observadas como reguladas positivamente nas amostras tratadas com LPS e poly(I:C) por 24 horas. Também observamos a presença de calnexina, que está regulada positivamente em ambas as amostras tratadas; essa proteína desempenha um papel importante no dobramento de glicoproteínas.Esses dados servem como uma plataforma para aplicar essa metodologia em diversos sistemas biológicos. Além disso, a interação entre a glicosilação de proteínas e a sinalização dependente de MyD88 foi relatada pela primeira vez utilizando uma abordagem (glico)proteômica
- Imprenta:
- Data da defesa: 29.04.2025
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo NÃO é de acesso aberto
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ABNT
MARQUES NETO, Antônio Moreira. Interação entre Myd88 e a glicosilação de proteínas: um elo perdido. 2025. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2025. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18122025-162800/. Acesso em: 27 jan. 2026. -
APA
Marques Neto, A. M. (2025). Interação entre Myd88 e a glicosilação de proteínas: um elo perdido (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18122025-162800/ -
NLM
Marques Neto AM. Interação entre Myd88 e a glicosilação de proteínas: um elo perdido [Internet]. 2025 ;[citado 2026 jan. 27 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18122025-162800/ -
Vancouver
Marques Neto AM. Interação entre Myd88 e a glicosilação de proteínas: um elo perdido [Internet]. 2025 ;[citado 2026 jan. 27 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18122025-162800/
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.42.2025.tde-18122025-162800 (Fonte: oaDOI API)
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