Tese

Avaliação da 4-hidroxibenzoato polipreniltransferase de Plasmodium falciparum (PfUbiA) na biossíntese de ubiquinonas (2022)

• Authors:
  • Alba, Camila Andrea Zafra
  • Katzin, Alejandro Miguel (Orientador)
• Autor USP: ALBA, CAMILA ANDREA ZAFRA - ICB
• Unidade: ICB
• Sigla do Departamento: BMP
• Subjects: PARASITOLOGIA; PLASMODIUM FALCIPARUM; MALÁRIA; ENZIMAS; ATIVAÇÃO ENZIMÁTICA; SACCHAROMYCES; LEVEDURAS; COMPOSTOS ORGÂNICOS
• Keywords: 4-Hidroxibenzoato; 4-Hidroxibenzoato; 4-hidroxibenzoato polipreniltranferase; 4-hidroxibenzoato polipreniltranferase; Plasmodium falciparum; Plasmodium falciparum; Saccharomyces cerevisiae; Saccharomyces cerevisiae; Ácido para-aminobenzóico; Ácido para-aminobenzóico; Complementação heteróloga; Complementação heteróloga; Malária; Malária; Ubiquinonas; Ubiquinonas
• Language: Português
• Abstract: Anteriormente, o nosso grupo identificou no estágio intraeritrocítico do Plasmodium falciparum a biossíntese de diversas moléculas isopreniladas, incluindo prenilquinonas de função respiratória como a menaquinona-4 (MQ-4) e isoformas de ubiquinona 8 e 9 (UQ). A Ubiquinona (UQ) é um componente fundamental da cadeia de transporte de elétrons, esta molécula é constituída por duas porções, uma isoprênica e uma aromática provenientes de vias metabólicas diferentes e que são condensadas pela atividade da enzima 4-hidroxibenzoato polipreniltransferase (Coq2) para a formação de ubiquinonas. Nosso grupo demonstrou a inibição da enzima PfCoq2 do Plasmodium falciparum pelo 4-nitrobenzoato, um análogo de um dos possíveis substratos da enzima, o 4-hidroxibenzoato (4-HB). Levando em consideração os resultados prévios, o objetivo deste projeto é estudar as características da enzima codificada pelo gene PfCOQ2 e sua participação no metabolismo de UQs do P. falciparum. Para cumprir com o objetivo, neste projeto analisou-se a funcionalidade da enzima por complementação heteróloga em cepas mutantes de Saccharomyces cerevisiae. Adicionalmente, com o intuito de observar quais são os possíveis doadores aromáticos na biossíntese de UQ no parasita, foram testados, mediante marcação metabólica, o 4-hidroxibenzoato (4-HB) e o ácido 4-aminobenzóico (pABA), por seremos mais estudados na literatura como precursores aromáticos em diferentes organismos.Para cumprir com os objetivos propostos, foram realizadas diferentes metodologias moleculares descritas no projeto, para que assim fosse possível realizar a complementação heteróloga da cepa mutante complementada com o gene COQ2 do P. falciparum e assim verificar a complementação tanto por o crescimento da cepa em meio com Glicerol (substrato não fermentativo) como por RP-HPLC e identificar as UQs biosintetizadas mediante marcação metabólica. Adicionalmente foram realizadas marcações metabólicas com os precursores aromáticos (4-HB e pABA) do P. falciparum para identificar o doador aromático utilizado no parasita para a biossíntese de UQ. É importante mencionar que, foram realizados testes avaliando a Concentração Media de Inibição (IC50) do pABA. Portanto, neste projeto, foi possível estabelecer o sistema para avaliar a funcionalidade de enzimas Coq2 por complementação heteróloga em S. cerevisiae. Do mesmo modo, foi possível complementar a levedura nocaute com o gene PfCOQ2 de Plasmodium falciparum, restaurando sua função mitocondrial. Quanto aos ensaios para identificar os precursores aromáticos naturais para a biossíntese de UQ no parasita, foi possível observar que o 4-HB é o doador aromático responsável por desempenhar tal função nas UQs. Semelhante como ocorre em outros organismos, o pABA não atua como precursor aromático das UQs no P. falciparum, podendo ser um possível inibidor, conforme os resultados obtidos neste projeto. Dessa forma, o estudo gera oportunidades para o desenvolvimento de novas combinações farmacológicas para o tratamento da malária, além de aprofundar o conhecimento do metabolismo bioenergético do parasita.
• Imprenta:
  • Publisher place: São Paulo
  • Date published: 2022
• Data da defesa: 07.04.2022


---

How to cite

A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

• ABNT

  ALBA, Camila Andrea Zafra. Avaliação da 4-hidroxibenzoato polipreniltransferase de Plasmodium falciparum (PfUbiA) na biossíntese de ubiquinonas. 2022. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2022. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-26112025-185947/. Acesso em: 13 fev. 2026.

• APA

  Alba, C. A. Z. (2022). Avaliação da 4-hidroxibenzoato polipreniltransferase de Plasmodium falciparum (PfUbiA) na biossíntese de ubiquinonas (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-26112025-185947/

• NLM

  Alba CAZ. Avaliação da 4-hidroxibenzoato polipreniltransferase de Plasmodium falciparum (PfUbiA) na biossíntese de ubiquinonas [Internet]. 2022 ;[citado 2026 fev. 13 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-26112025-185947/

• Vancouver

  Alba CAZ. Avaliação da 4-hidroxibenzoato polipreniltransferase de Plasmodium falciparum (PfUbiA) na biossíntese de ubiquinonas [Internet]. 2022 ;[citado 2026 fev. 13 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-26112025-185947/

Últimas obras dos mesmos autores vinculados com a USP cadastradas na BDPI:

• Exploring ubiquinone biosynthesis inhibition as a strategy for improving atovaquone efficacy in Malaria