Análise do papel de LABCG1 na virulência de L. (L.) amazonensis usando silenciamento por CRISPR-Cas9 (2025)
- Authors:
- Autor USP: BARBOSA, GUSTAVO ROLIM - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMP
- DOI: 10.11606/T.42.2025.tde-06112025-184003
- Subjects: PARASITOLOGIA; LEISHMANIA; VIRULÊNCIA; LEISHMANIOSE VISCERAL; FAGOCITOSE; PROTEÍNAS DE FLUORESCÊNCIA VERDE; LEISHMANIOSE CUTÂNEA
- Keywords: Leishmania (Leishmania) amazonenses; Leishmania (Leishmania) amazonensis; Cepas; CRISPR-Cas9; Enolase; Enolase; Fator de Virulência; LABCG1; LABCG1; LV79; LV79; PH8; PH8; Strains; Virulence Factor, CRISPR-Cas9
- Language: Português
- Abstract: As leishmanioses constituem um complexo de doenças causadas por protozoários parasitos do gênero Leishmania. A doença é classificada em duas formas clínicas principais: leishmaniose tegumentar ou leishmaniose visceral. Nosso grupo tem trabalhado com as cepas LV79 e PH8 de Leishmania (Leishmania) amazonensis, uma das espécies dermotrópicas predominantes no Brasil. A cepa PH8 é mais infectiva in vitro e virulenta in vivo em relação a cepa LV79. A análise da composição da membrana de promastigotas das duas cepas demonstrou que proteínas como enolase e LABCG1 estavam 1.98x e 23.57x mais abundantes em PH8 em comparação a LV79, respectivamente. Para avaliar se o transportador LABCG1 é um importante fator de virulência em PH8, utilizamos a tecnologia de CRISPR-Cas9 para gerar mutantes knockout deste gene. Em paralelo, etiquetamos enolase e LABCG1 em ambas as cepas com o intuito de avaliar localização e abundância dessas proteínas nas diferentes fases de desenvolvimento do parasito. A criação de linhagens knockout de LABCG1 foi realizada com sucesso e nossos resultados mostraram que a perda de LABCG1 não altera a metaciclogênese, a fagocitose e a resistência a lise por complemento. O knockout de LABCG1 apresentou uma redução em sua infectividade. No entanto, a deleção de LABCG1 não impacta na virulência do parasito em camundongos BALB/c. O etiquetamento do LABCG1 não foi bem-sucedido em nenhuma das cepas e, embora tenhamos conseguido etiquetar a enolase, a análise dessas linhagens não foi possível principalmente devido à falta de estabilidade da proteína fluorescente. Nossos resultados demonstraram que a deleção do LABCG1 afeta a infectividade da cepa PH8, apesar de não ser importante para a sua virulência.
- Imprenta:
- Data da defesa: 25.06.2025
- Este periódico é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
BARBOSA, Gustavo Rolim. Análise do papel de LABCG1 na virulência de L. (L.) amazonensis usando silenciamento por CRISPR-Cas9. 2025. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2025. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06112025-184003/. Acesso em: 04 dez. 2025. -
APA
Barbosa, G. R. (2025). Análise do papel de LABCG1 na virulência de L. (L.) amazonensis usando silenciamento por CRISPR-Cas9 (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06112025-184003/ -
NLM
Barbosa GR. Análise do papel de LABCG1 na virulência de L. (L.) amazonensis usando silenciamento por CRISPR-Cas9 [Internet]. 2025 ;[citado 2025 dez. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06112025-184003/ -
Vancouver
Barbosa GR. Análise do papel de LABCG1 na virulência de L. (L.) amazonensis usando silenciamento por CRISPR-Cas9 [Internet]. 2025 ;[citado 2025 dez. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06112025-184003/ - Importância da Oligopeptidase B (OPB) na infecção de macrófagos medulares por Leishmania (Leishmania) amazonensis
- Isolation and characterisation of Leishmania (Leishmania) infantum from cutaneous leishmaniasis patients in northeast Brazil
- Characterization of Leishmania (L.) amazonensis oligopeptidase B and its role in macrophage infection
- Proteome and morphological analysis show unexpected differences between promastigotes of Leishmania amazonensis PH8 and LV79 strains
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.42.2025.tde-06112025-184003 (Fonte: oaDOI API)
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