Expressão heteróloga e caracterização de uma beta-glucanase identificada na saliva do inseto Pseudolicoriella hygida (2024)
- Authors:
- Autor USP: LOPES, VÍTOR KUNES - FFCLRP
- Unidade: FFCLRP
- Sigla do Departamento: 593
- DOI: 10.11606/D.59.2024.tde-02122024-165918
- Subjects: INSETOS; SALIVA; DIPTERA
- Keywords: beta-glucanases; Biomass saccharification; Biorefinery; Biorrefinaria; Etanol de segunda geração; Pseudolicoriella hygida; Sacarificação de biomassa; Second generation ethanol
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A biorrefinaria é uma das vertentes da economia circular de base biológica, a qual visa a transformação de biomassa em produtos químicos de interesse industrial e em energia limpa. A utilização de enzimas ativas contra carboidratos (Carbohydrate Active Enzymes - CAZymes) na degradação de biomassa está ganhando destaque devido aos seus diversos benefícios e vantagens, e a busca de enzimas de várias fontes é uma área de pesquisa dinâmica e em expansão. Apesar de insetos apresentarem ampla distribuição geográfica, um grande número de espécies distribuídas em pelo menos 30 ordens e hábitos alimentares diversificados, as CAZymes de insetos são pouco exploradas. Um recente estudo -ômico do inseto Pseudolicoriella hygida identificou um conjunto de β-glucanases no genoma e no transcriptoma que estão presentes no proteoma da saliva das larvas. A presença destas enzimas na saliva de larvas foi posteriormente confirmada através de ensaios de atividade enzimática. Nesse contexto, os objetivos desse trabalho foram a expressão, purificação e caracterização bioquímica das CAZymes encontradas no genoma de Psl. hygida. Os cDNAs que codificam cinco enzimas foram extraídas e amplificadascom sucesso. As enzimas Bhyg_04913/pET-28a, Bhyg_13095/pET-28a e Bhyg_05920/pET-22b foram expressas com sucesso em sistema procariótico se utilizando de baixas temperaturas. A enzima Bhyg_05920/pET-22b, que possui um peso molecular aproximado de 42 kDa, foi purificada e caracterizada. Essa enzima se mostrou mais ativa em pH 8.0 e tampão Tris-HCl 50 mM, apresentando uma atividade de 4676 U.mg-1 . Além disso, apresentou atividade em condições ácidas e básicas, preservando 50% da atividade em pH 4.0 e 52% em pH 11.0. A temperatura ótima da enzima foi de 80 °C, apresentando ótima termotolerância, sendo capaz de manter 53% de atividade a 60 °C e 44% a 90 °C. Além disso, a análise estrutural comparativa identificou diferenças marcantes que explicam a atividade da enzima contra ligações β-1,4 glicosídicas, e a ausência de atividade contra ligações β-1,3 e ligações β-1,3/β-1,4. Os resultados obtidos sugerem bom potencial de aplicação no ramo industrial da biorrefinaria, sendo capaz de suportar altas temperaturas utilizadas no processamento de biomassa e também se mostrou ativa em uma ampla faixa de pH, sendo essa uma característica desejada para lidar com os problemas causados no prétratamento da matéria-prima, e também no processamento de biomassa
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- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2024
- Data da defesa: 01.10.2024
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo NÃO é de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: closed
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ABNT
LOPES, Vítor Kunes. Expressão heteróloga e caracterização de uma beta-glucanase identificada na saliva do inseto Pseudolicoriella hygida. 2024. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-02122024-165918/. Acesso em: 10 jan. 2026. -
APA
Lopes, V. K. (2024). Expressão heteróloga e caracterização de uma beta-glucanase identificada na saliva do inseto Pseudolicoriella hygida (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-02122024-165918/ -
NLM
Lopes VK. Expressão heteróloga e caracterização de uma beta-glucanase identificada na saliva do inseto Pseudolicoriella hygida [Internet]. 2024 ;[citado 2026 jan. 10 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-02122024-165918/ -
Vancouver
Lopes VK. Expressão heteróloga e caracterização de uma beta-glucanase identificada na saliva do inseto Pseudolicoriella hygida [Internet]. 2024 ;[citado 2026 jan. 10 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-02122024-165918/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.59.2024.tde-02122024-165918 (Fonte: oaDOI API)
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