Matriz extracelular pulmonar descelularizada submetida a cultivo celular sob estímulo mecânico respiratório como plataforma para uso na medicina regenerativa (2025)
- Authors:
- Autor USP: JÚNIOR, LEANDRO NORBERTO DA SILVA - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VCI
- DOI: 10.11606/T.10.2025.tde-13062025-151430
- Subjects: MEDICINA REGENERATIVA; PULMÃO; REATORES BIOQUÍMICOS
- Keywords: Bioreactor; Decellularization; Lungs; Recellularization
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A bioengenharia pulmonar pode ser uma ferramenta terapêutica em potencial na obtenção de pulmões para transplante em pacientes em uma fase muito avançada de doenças respiratórias. Embora a bioengenharia seja uma abordagem clínica regenerativa já proposta para os diferentes órgãos, ela tem sido aplicada em menor escala para os pulmões, com poucos relatos de tentativas preliminares. A complexidade estrutural da árvore brônquica e circulação pulmonar e do envolvimento de estímulos mecânicos associados à respiração atuam como complicadores. Mantendo assim, muitos obstáculos técnicos permanecem para se alcançar um pulmão reconstruído funcional para transplante. A incapacidade de recelularizar eficientemente a vasculatura pulmonar com um endotélio funcional parece ser a principal causa de insucesso dos transplantes pulmonares com pulmões recelularizados até o momento. O objetivo principal deste estudo foi desenvolver um protocolo eficiente de reendotelização em pulmões descelularizados de ratos. Os objetivos específicos se dividem em: estabelecer um protocolo eficiente de descelularização de pulmões murinos inteiros; avaliar a integridade composicional e estrutural de matriz extracelular (MEC); promover a reendotelização pulmonar por meio de células percursoras endoteliais e avaliar a maturação endotelial. Para tal, os pulmões foram coletados e, posteriormente, foram realizados os processos de: descelularização, seguido da quantificação de DNA, análise por técnicas histológicas,de imuno-histoquímica, microscopia eletrônica de varredura, esterilização, avaliação de citocompatibilidade utilizando fibroblastos murinos (3T3) e Células Percursoras Endoteliais do Saco Vitelino Caninas (YS) e posterior recelularização em biorreator com estiramento cíclico respiratório com YS. Como resultado obtive-se que o protocolo de perfusão controlada e alternada dos detergentes Triton X-100 e Dodecil-Sulfato de Sódio geram um scaffold pulmonar inteiro estruturado que mantem a composição da MEC, além de fornecer scaffold que permite a adesão e proliferação celular como demonstrado com o teste de oxidação de resazurina. Já o protocolo de reendotelização, demonstrou que as YS conseguiram migrar e aderir no scaffold inteiro de forma homogênea como auxílio de estiramento cíclico respiratório dos scaffolds durante o protocolo de cultivo celular. Com os resultados obtidos no presente estudo, conclui-se que a soma de protocolos de cultivo celular e tecnologias que mimetizem a fisiologia do órgão a ser reconstituído, favorecem a reconstituição de tecidos in vitro e somam para a futura produção de órgãos funcionais para transplante. Contribuindo assim para a diminuição das filas de transplante, fornecendo tecidos personalizados e independentes de compatibilidade genética entre doador e receptor
- Imprenta:
- Data da defesa: 04.04.2025
- Status:
- Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access)
- Versão do Documento:
- Versão publicada (Published version)
- Acessar versão aberta:
-
ABNT
JÚNIOR, Leandro Norberto da Silva. Matriz extracelular pulmonar descelularizada submetida a cultivo celular sob estímulo mecânico respiratório como plataforma para uso na medicina regenerativa. 2025. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2025. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062025-151430/. Acesso em: 01 abr. 2026. -
APA
Júnior, L. N. da S. (2025). Matriz extracelular pulmonar descelularizada submetida a cultivo celular sob estímulo mecânico respiratório como plataforma para uso na medicina regenerativa (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062025-151430/ -
NLM
Júnior LN da S. Matriz extracelular pulmonar descelularizada submetida a cultivo celular sob estímulo mecânico respiratório como plataforma para uso na medicina regenerativa [Internet]. 2025 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062025-151430/ -
Vancouver
Júnior LN da S. Matriz extracelular pulmonar descelularizada submetida a cultivo celular sob estímulo mecânico respiratório como plataforma para uso na medicina regenerativa [Internet]. 2025 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062025-151430/ - Produção de scaffolds gengivais para o tratamento de lesões periodontais
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