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Tese

Edição dos genes CSN2 (β-caseína) e LGB (β-lactoglobulina) por CRISPR/Cas9 em células MAC-T como modelo de produção de proteínas recombinantes (2023)

  • Authors:
  • Autor USP: MARIANO JÚNIOR, CLESIO GOMES - FZEA
  • Unidade: FZEA
  • Sigla do Departamento: ZMV
  • DOI: 10.11606/D.74.2023.tde-29052025-083903
  • Subjects: BOVINOS; ENGENHARIA GENÉTICA; GENOMAS; PROTEÍNAS RECOMBINANTES
  • Agências de fomento:
  • Language: Português
  • Abstract: A produção e comercialização de proteínas recombinantes é um mercado bilionário e em constante expansão. Devido às limitações dos modelos de produção em bactérias e leveduras foram surgindo métodos alternativos, como os baseados em células de mamíferos. Uma das abordagens mais promissoras neste sentido é a de produzir proteínas recombinantes nas glândulas mamárias de bovinos aproveitando toda a maquinaria molecular de expressão proteica no leite desses animais e substituindo as duas principais proteínas nele presentes, a β-caseína (CSN2) e a β-lactoglobulina (LGB) por outras proteínas de interesse comercial. Com isso, este projeto teve como objetivo nocautear estes genes em células de glândula mamária de Bos taurus pela tecnologia CRISPR/Cas9. Para o estabelecimento da linhagem celular editada foram padronizadas todas as etapas de edição gênica, que incluem o desenho e montagem dos RNAs guia do sistema CRISPR/Cas9, transfecção das células MAC-T, sequenciamento, análise da frequência de indels, citometria de fluxo e separação das células por sorting, geração, seleção e validação dos clones editados. Nas transfecções realizadas por Lipofectamina obtivemos eficiência máxima de 1,9% e após análises não foi possível encontrar clones com edições por CRISPR/Cas9 nos genes CSN2 e LGB
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 29.09.2023
    • Acesso à fonteAcesso à fonteDOI

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    Status:
    Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access)
    Versão do Documento:
    Versão publicada (Published version)
    Acessar versão aberta:

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    How to cite
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    • ABNT

      MARIANO JÚNIOR, Clésio Gomes. Edição dos genes CSN2 (β-caseína) e LGB (β-lactoglobulina) por CRISPR/Cas9 em células MAC-T como modelo de produção de proteínas recombinantes. 2023. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2023. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29052025-083903/. Acesso em: 02 abr. 2026.

    • APA

      Mariano Júnior, C. G. (2023). Edição dos genes CSN2 (β-caseína) e LGB (β-lactoglobulina) por CRISPR/Cas9 em células MAC-T como modelo de produção de proteínas recombinantes (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Pirassununga. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29052025-083903/

    • NLM

      Mariano Júnior CG. Edição dos genes CSN2 (β-caseína) e LGB (β-lactoglobulina) por CRISPR/Cas9 em células MAC-T como modelo de produção de proteínas recombinantes [Internet]. 2023 ;[citado 2026 abr. 02 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29052025-083903/

    • Vancouver

      Mariano Júnior CG. Edição dos genes CSN2 (β-caseína) e LGB (β-lactoglobulina) por CRISPR/Cas9 em células MAC-T como modelo de produção de proteínas recombinantes [Internet]. 2023 ;[citado 2026 abr. 02 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29052025-083903/

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