Estratégia de inibição da proliferação celular da linhagem Hs578T derivada detumor mamário humano através de nocauteamento duplo dos genes CHD4 e SETDB1 por CRISPR-Cas9 (2020)
- Authors:
- Autor USP: ALMEIDA, MARIELE SANTOS MORAES DE - Interunidades em Biotecnologia
- Unidade: Interunidades em Biotecnologia
- DOI: 10.11606/D.87.2020.tde-16052024-105416
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; NEOPLASIAS MAMÁRIAS; CÉLULAS CULTIVADAS DE TUMOR; LINHAGEM CELULAR; PROLIFERAÇÃO CELULAR; MUTAÇÃO GENÉTICA; DANO AO DNA
- Keywords: Breast cancer; Câncer de mama; CHD4; CHD4; CRISPR-Cas9; CRISPR-Cas9; Letalidade sintética; SETDB1; SETDB1; Synthetic lethality
- Language: Português
- Abstract: O câncer é um dos principais problemas de saúde pública. As neoplasias decorrem de mutações em genes que controlam funções celulares básicas, como, por exemplo, proliferação celular e reparo aos danos causados ao material genético. Células cancerosas dependem da função de um conjunto de genes para sua sobrevivência, portanto, a identificação de vulnerabilidades genéticas específicas no câncer pode permitir identificar novos alvos terapêuticos. Nesse sentido, dois processos celulares são particularmente promissores, os quais estão envolvidos no reparo de danos ao DNA e no silenciamento epigenético da transcrição. Neste trabalho, propusemos avaliar o impacto da inibição individual ou combinada de dois potenciais alvos de vulnerabilidade genética, sendo um membro da família CHD de proteínas remodeladoras da cromatina (CHD4), e o outro um membro da família das histonas metiltransferases (SETDB1), sobre as características fenotípicas das células Hs578T. Esta linhagem celular humana constitui um modelo do câncer de mama triplo negativo (TNBC), um subtipo de câncer de mama sem alvos moleculares validados para tratamento. Nossa abordagem experimental envolveu o uso da ferramenta de edição gênica CRISPR-Cas9 para promover edições mutagênicas nos loci genômicos correspondentes aos domínios catalíticos de SETDB1 e CHD4.Nossos principais achados incluem: a) a edição mutagênica no éxon 22 de SETDB1 sensibiliza as células Hs578T à ação do quimioterápico genotóxico doxorrubicina; b) através da edição mutagênica sequencial do éxon 22 de SETDB1 e do éxon 23 de CHD4, seguida do rastreamento da porcentagem das sequências do tipo selvagem remanescentes nas populações de células mistas geradas, obtivemos evidências da existência de uma interação de letalidade sintética entre esses genes. Considerando a falta de alvos moleculares para o TNBC, esperamos que nossos resultados possam fornecer informações valiosas para o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas para esse e outros tipos de câncer
- Imprenta:
- Data da defesa: 10.09.2020
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo NÃO é de acesso aberto
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ABNT
ALMEIDA, Mariele Santos Moraes de. Estratégia de inibição da proliferação celular da linhagem Hs578T derivada detumor mamário humano através de nocauteamento duplo dos genes CHD4 e SETDB1 por CRISPR-Cas9. 2020. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052024-105416/. Acesso em: 25 jan. 2026. -
APA
Almeida, M. S. M. de. (2020). Estratégia de inibição da proliferação celular da linhagem Hs578T derivada detumor mamário humano através de nocauteamento duplo dos genes CHD4 e SETDB1 por CRISPR-Cas9 (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052024-105416/ -
NLM
Almeida MSM de. Estratégia de inibição da proliferação celular da linhagem Hs578T derivada detumor mamário humano através de nocauteamento duplo dos genes CHD4 e SETDB1 por CRISPR-Cas9 [Internet]. 2020 ;[citado 2026 jan. 25 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052024-105416/ -
Vancouver
Almeida MSM de. Estratégia de inibição da proliferação celular da linhagem Hs578T derivada detumor mamário humano através de nocauteamento duplo dos genes CHD4 e SETDB1 por CRISPR-Cas9 [Internet]. 2020 ;[citado 2026 jan. 25 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052024-105416/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.87.2020.tde-16052024-105416 (Fonte: oaDOI API)
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