Funções celulares do complexo PARP9/DTX3L (2024)
- Authors:
- Autor USP: RIBEIRO, VICTÓRIA CHAVES - IQ
- Unidade: IQ
- DOI: 10.11606/T.46.2024.tde-11042025-114420
- Subjects: BIOQUÍMICA CELULAR; CORONAVIRUS
- Keywords: ADP-ribosilação; ADP-ribosylation; DTX3L; DTX3L; interferon; Interferon; PARP14; PARP14; PARP9; PARP9; SARS-CoV-2; SARS-CoV-2
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Modificações pós-traducionais, como ubiquitinação e ADP-ribosilação, que consiste na adição de unidades de ADP-ribose catalisada por enzimas da família PARP, permitem uma sinalização celular rápida, importante para várias vias celulares, como reparo de DNA e resposta imune. Foi sugerido previamente que o heterodímero PARP9/DTX3L, com atividade ADP-ribosiltransferase e E3 ubiquitina ligase, poderia estar envolvido no reparo de DNA e/ou infecções virais, mas sua atividade fisiológica permanecia pouco conhecida. Por isto, o objetivo deste estudo foi identificar a função celular do complexo PARP9/DTX3L. Nós demonstramos aqui que PARP9 e DTX3L não parecem ter um papel proeminente no reparo de DNA em células humanas hTERT RPE-1, conforme avaliado pelo ensaio de sobrevivência clonogênica, formação de focos de yH2AX e 53BP1 e acúmulo de micronúcleos em células selvagens e knockout para DTX3L tratadas com agentes que induzem diferentes tipos de danos ao DNA. No entanto, nós mostramos um papel importante de PARP9/DTX3L na resposta interferon (IFN), um dos principais componentes da imunidade inata. Nesse contexto, o complexo PARP9/DTX3L é superexpresso e regula os níveis proteicos de outra ADPribosiltransferase, PARP14, sem afetar sua transcrição, conforme medido por RTqPCR e imunoblot.Em resposta a IFN, PARP14 se auto-ADP-ribosila, e trans-ADPribosila DTX3L e possivelmente outros alvos, conforme determinado por imunofluorescência e um pulldown para purificar proteínas ADP-ribosiladas do lisado celular. Esta ADP-ribosilação induzida por IFN forma pontos citoplasmáticos que colocalizam com PARP9, DTX3L, PARP14, p62 e ubiquitina, conforme avaliado por imunofluorescência. Dado que um subconjunto de vírus de RNA de fita positiva, como alfavírus e coronavírus, codificam um macrodomínio com atividade de ADPribosilhidrolase que potencialmente revertem a ADP-ribosilação induzida por IFN do hospedeiro, empregamos células que expressam ectopicamente o macrodomínio 1 do SARS-CoV-2 e observamos que este remove parcialmente a modificação que detectamos. Portanto, DTX3L e PARP14 são potenciais alvos celulares do macrodomínio 1 do SARS-CoV-2. Em conjunto, esses resultados indicam que, embora o complexo PARP9/DTX3L não tenha um papel proeminente no reparo de DNA em linhagens celulares humanas, ele parece ser um componente importante da resposta antiviral humana.
- Imprenta:
- Data da defesa: 19.06.2024
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
- URL de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
RIBEIRO, Victoria Chaves. Funções celulares do complexo PARP9/DTX3L. 2024. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11042025-114420/. Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Ribeiro, V. C. (2024). Funções celulares do complexo PARP9/DTX3L (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11042025-114420/ -
NLM
Ribeiro VC. Funções celulares do complexo PARP9/DTX3L [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11042025-114420/ -
Vancouver
Ribeiro VC. Funções celulares do complexo PARP9/DTX3L [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11042025-114420/
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.46.2024.tde-11042025-114420 (Fonte: oaDOI API)
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
