Desenvolvimento do modelo de pseudovírus com expressão da proteína Spike de SARS-CoV-2 para ensaios de neutralização e Fotoinativação utilizando células HEK293T-ACE2 (2025)
- Authors:
- Autor USP: PINTO JÚNIOR, FÁBIO FRANCISCO - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FCM
- DOI: 10.11606/T.76.2025.tde-08042025-081044
- Subjects: FOTÔNICA; CORONAVIRUS
- Keywords: Enveloped virus; Inativação fotodinâmica; Inativação viral; Luz UV-C; Photodynamic inactivation; Pseudovírus SARS-CoV-2; SARS-CoV-2 pseudovirus; UV-C light; Viral inactivation; Vírus envelopado
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Diferentes estratégias baseadas em luz são investigadas para inativar vírus. Aqui, desenvolveu-se um modelo pseudotipado baseado em HIV de SARS-CoV-2 para estudar os mecanismos de inativação do vírus usando duas estratégias diferentes; a fotoinativação por luz UV-C e inativação fotodinâmica (IF) com o fotossensibilizador Photodithazine (PDZ). Construiu-se para isso duas partículas pseudovirais sendo uma que abrigou o gene repórter Luciferase-IRES-ZsGreen com a expressão da proteína S, Spike, espícula do SARS-CoV-2, na membrana e outra sem a spike como um pseudovírus de controle puro. Os mecanismos de inativação viral por UV-C e IF baseados em PDZ foram estudados por meio das caracterizações bioquímicas e PCR quantitativo em quatro níveis; danos virais de células livres; entrada de células virais; integração de DNA; e a expressão de genes repórteres. Os tratamentos de UV-C e de PDZ podem destruir o RNA de fita simples (ssRNA) e a proteína spike do vírus, com proporções diferentes de danos. No entanto, o vírus ainda foi capaz de se ligar e entrar nas células HEK293T com expressão da enzima conversora de angiotensina 2 (ACE- 2). Uma maneira dependente da dose de irradiação UV-C danifica principalmente o ssRNA, enquanto a IF baseada em PDZ destrói principalmente a espícula e a membrana viral em concentrações e maneiras dependentes da dose. Observou-se que as células infectadas pelo vírus e tratadas com UV-C ou IF à base de PDZ não expressaram o gene repórter da luciferase,significando a inativação viral, apesar da presença dos genes de RNA e de DNA estarem intactos
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2025
- Data da defesa: 28.02.2025
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
- URL de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
PINTO JUNIOR, Fabio Francisco. Desenvolvimento do modelo de pseudovírus com expressão da proteína Spike de SARS-CoV-2 para ensaios de neutralização e Fotoinativação utilizando células HEK293T-ACE2. 2025. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2025. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-08042025-081044/. Acesso em: 26 dez. 2025. -
APA
Pinto Junior, F. F. (2025). Desenvolvimento do modelo de pseudovírus com expressão da proteína Spike de SARS-CoV-2 para ensaios de neutralização e Fotoinativação utilizando células HEK293T-ACE2 (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-08042025-081044/ -
NLM
Pinto Junior FF. Desenvolvimento do modelo de pseudovírus com expressão da proteína Spike de SARS-CoV-2 para ensaios de neutralização e Fotoinativação utilizando células HEK293T-ACE2 [Internet]. 2025 ;[citado 2025 dez. 26 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-08042025-081044/ -
Vancouver
Pinto Junior FF. Desenvolvimento do modelo de pseudovírus com expressão da proteína Spike de SARS-CoV-2 para ensaios de neutralização e Fotoinativação utilizando células HEK293T-ACE2 [Internet]. 2025 ;[citado 2025 dez. 26 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-08042025-081044/ - Interação e internalização de curcumina em culturas bacterianas
- Study of the mechanism of viral entry inhibitors by photoinactivation using UV-C and PDZ and neutralization assay with SARS-CoV-2 pseudovirus in BSL2 laboratory
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- Study of the mechanism of viral entry inhibitors and SARS-CoV-2 pseudovirus neutralization assay in the BSL2 laboratory
- Optimization of curcumin aqueous formulations for fluorescence-based applications
- Optimization of curcumin aqueous formulations for fluorescence-based applications
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- Study of the mechanism of viral entry inhibitors and SARS-CoV-2 pseudovirus neutralization assay in the BSL2 laboratory
- Study of viral photoinactivation by UV-C light and photosensitizer using a pseudotyped model
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.76.2025.tde-08042025-081044 (Fonte: oaDOI API)
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