Teste de aglutinação em látex para diagnóstico de Escherichia coli enteroagregativa: dispersina como alvo para detecção (2024)
- Authors:
- Autor USP: FLORÊNCIO, CAROLINE - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBC
- DOI: 10.11606/D.9.2024.tde-17012025-154523
- Subjects: DIAGNÓSTICO; ESCHERICHIA COLI; PROTEÍNAS; LABORATÓRIOS; ANTICORPOS
- Keywords: Aglutinação em látex; Anticorpo policlonal; Diagnosis; Diagnóstico; Dispersin; Dispersina; Enteroaggregative Escherichia coli; Escherichia coli enteroagregativa; Látex agglutination; Polyclonal antibody
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) é considerado um patotipo heterogêneo, pois nem todas as cepas apresentam os mesmos fatores de virulência, o que dificulta o seu diagnóstico laboratorial. Embora testes moleculares tenham sido padronizados e avaliados, na tentativa de substituir o ensaio de adesão in vitro que define o padrão agregativo em células epiteliais cultivadas, a presença de genes em isolados bacterianos não garante a sua expressão ou a produção de seus fatores de virulência associados. Análises dos genomas de EAEC em bancos de dados (NCBI) mostraram que a maioria das cepas carrega o gene aap, o qual codifica a dispersina, sugerindo que ela poderia ser usada como um excelente marcador para a detecção de EAEC. Desta forma o objetivo deste estudo foi desenvolver e padronizar um ensaio de aglutinação em látex para o diagnóstico rápido deste patotipo, visando a detecção da dispersina. Inicialmente, a dispersina recombinante foi purificada para produção de antissoro específico. Após a purificação do soro, o IgG foi conjugado a partículas de látex para a padronização do teste de aglutinação.Para avaliação da detecção da dispersina, duas condições de cultivo bacteriano foram avaliadas: caldo Tryptic Soy Broth (TSB) e ágar MacConkey, ajustando-se a concentração bacteriana para unidades formadoras de colônia ou pela escala de McFarland; sendo assim a maior positividade de detecção foi observada quando as cepas foram cultivadas em TSB, obtendo-se uma positividade de 83% e negatividade de 96%. Para validação dos testes, utilizou-se o ensaio de ELISA indireto, que definiu as cepas verdadeiramente produtoras de dispersina e as cepas não produtoras. Dessa forma, o teste de aglutinação em látex apresentou sensibilidade de 90%, especificidade de 100% e eficiência de 95%. Esses resultados sustentam o potencial do teste de aglutinação em látex para o diagnóstico de EAEC, especialmente em laboratórios com pouca infraestrutura
- Imprenta:
- Data da defesa: 11.09.2024
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
FLORÊNCIO, Caroline. Teste de aglutinação em látex para diagnóstico de Escherichia coli enteroagregativa: dispersina como alvo para detecção. 2024. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-17012025-154523/. Acesso em: 03 jan. 2026. -
APA
Florêncio, C. (2024). Teste de aglutinação em látex para diagnóstico de Escherichia coli enteroagregativa: dispersina como alvo para detecção (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-17012025-154523/ -
NLM
Florêncio C. Teste de aglutinação em látex para diagnóstico de Escherichia coli enteroagregativa: dispersina como alvo para detecção [Internet]. 2024 ;[citado 2026 jan. 03 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-17012025-154523/ -
Vancouver
Florêncio C. Teste de aglutinação em látex para diagnóstico de Escherichia coli enteroagregativa: dispersina como alvo para detecção [Internet]. 2024 ;[citado 2026 jan. 03 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-17012025-154523/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.9.2024.tde-17012025-154523 (Fonte: oaDOI API)
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