Análise de possíveis peptídeos imunogênicos da proteína lectina do tipo 1 de Toxocara canis para o aprimoramento do imunodiagnóstico em modelo murino experimental (2024)
- Authors:
- Autor USP: FONSECA, GABRIELA RODRIGUES E - FM
- Unidade: FM
- DOI: 10.11606/T.5.2024.tde-26112024-134349
- Subjects: CAMUNDONGOS; TESTES IMUNOLÓGICOS; TOXOCARA CANIS
- Keywords: Immunodiagnosis; Mice; Peptídeo sintético; Synthetic peptide
- Language: Português
- Abstract: Nematódeos do gênero Toxocara são responsáveis pela toxocaríase, zoonose de abrangência mundial, mas negligenciada. Em humanos, seus hospedeiros paratênicos, Toxocara pode causar larva migrans visceral e ocular, toxocaríase oculta e neurotoxocaríase. O diagnóstico é realizado por detecção de anticorpos contra antígenos de excreção-secreção do parasito, mas apresenta desvantagens como reatividade-cruzada. É possível aprimorar o diagnóstico ao associar inovação e o estudo da dinâmica da infecção. Assim, o presente estudo tem a finalidade de identificar peptídeos sintéticos da lectina do tipo C 1 de Toxocara canis (Tc-CTL-1) e avaliar sua aplicação em métodos imunodiagnósticos. Camundongos BALB/c foram divididos em grupos saudáveis e inoculados com T. canis, Strongyloides venezuelensis, Schistosoma mansoni e Ascaris suum. Os animais foram anestesiados e eutanasiados após uma, duas, 4 ou 6, 8, 12 e 22 semanas de infecção. Os peptídeos foram selecionados in silico e experimentalmente por Dot-blot e ELISA. A análise in silico foi realizada em conjunto por quatro programas de predição de peptídeos de células B, análise de homologia pelo BLASTp, modelagem 3D da proteína e identificação de peptídeo sinal. Foram selecionados peptídeos com 50% ou mais da sua sequência identificado por ao menos dois programas, presentes em sua maioria em regiões coil, não participantes de sequências de peptídeo-sinal, homóloga à proteína Tc-CTL-1, com menor e-value e maior porcentagem de identificação.Os peptídeos selecionados in silico foram sintetizados por técnica SPOT, testados e avaliados por Dot-blot. Foram selecionados peptídeos com maior imunogenicidade e menor reatividade-cruzada para posterior síntese de peptídeos em fase sólida e análise pela técnica de ELISA. Cinquenta e cinco peptídeos foram selecionados pela análise in silico. No Dot-blot, houve reconhecimento intenso dos peptídeos pelo IgG anti-Toxocara, mas houve reatividade-cruzada com animais inoculados com A. suum. Quatro peptídeos foram sintetizados e avaliados por ELISA, que apresentaram resultados inconsistentes. A discrepância nos resultados entra as duas técnicas diagnósticas indicam a possibilidade de proteínas de outros parasitos com sequências peptídicas idênticas às da Tc-CTL-1, mas ainda não descritas ou inclusas em banco de dados. Ademais, há necessidade de aprofundar os estudos translacionais e aplicados sobre a aplicação de peptídeos sintéticos às diversas plataformas de imunodiagnóstico. Logo, peptídeos sintéticos devem ser considerados como um novo caminho para a inovação do diagnóstico da toxocaríase
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- Data da defesa: 15.08.2024
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ABNT
FONSECA, Gabriela Rodrigues e. Análise de possíveis peptídeos imunogênicos da proteína lectina do tipo 1 de Toxocara canis para o aprimoramento do imunodiagnóstico em modelo murino experimental. 2024. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-26112024-134349/. Acesso em: 23 maio 2025. -
APA
Fonseca, G. R. e. (2024). Análise de possíveis peptídeos imunogênicos da proteína lectina do tipo 1 de Toxocara canis para o aprimoramento do imunodiagnóstico em modelo murino experimental (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-26112024-134349/ -
NLM
Fonseca GR e. Análise de possíveis peptídeos imunogênicos da proteína lectina do tipo 1 de Toxocara canis para o aprimoramento do imunodiagnóstico em modelo murino experimental [Internet]. 2024 ;[citado 2025 maio 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-26112024-134349/ -
Vancouver
Fonseca GR e. Análise de possíveis peptídeos imunogênicos da proteína lectina do tipo 1 de Toxocara canis para o aprimoramento do imunodiagnóstico em modelo murino experimental [Internet]. 2024 ;[citado 2025 maio 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-26112024-134349/
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.5.2024.tde-26112024-134349 (Fonte: oaDOI API)
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