Spermatozoa binding to bovine oviduct cells: the influence of the endocrine milieu on the effectiveness of the binding test in vitro (2024)
- Authors:
- Autor USP: SOUZA, PAULA RENATA CORTAT DE - ESALQ
- Unidade: ESALQ
- Sigla do Departamento: LZT
- DOI: 10.11606/D.11.2024.tde-08102024-115308
- Subjects: CÉLULAS EPITELIAIS; ESPERMATOZOIDES ANIMAL; FERTILIDADE; PROGESTERONA; REPRODUÇÃO ANIMAL; TOUROS; TUBAS UTERINAS
- Agências de fomento:
- Language: Inglês
- Abstract: A análise da fertilidade de touros a campo é um processo demorado e de baixa acurácia. Alguns estudos in vitro têm demonstrado a capacidade dos espermatozoides de se ligarem às células epiteliais da tuba uterina bovina (BOEC) antes da fecundação. Esse teste de ligação mostrou uma correlação elevada com a fertilidade; no entanto, não há relatos na literatura sobre a realização dessa técnica em modelos de vacas em fases conhecidas do ciclo estral. Portanto, o presente estudo tem como objetivo caracterizar o melhor modelo de cultivo de BOEC para realizar este teste de fertilidade, de acordo com a estrutura ovariana e ambiente endócrinos das células no momento da colheita. Para isso, foram realizados dois experimentos. No primeiro estudo, BOEC obtidas da região do istmo de peças de abatedouro foram utilizadas. As peças foram separadas de acordo com a presença de um corpo lúteo (CL) ou um folículo dominante (FD) presente em um dos ovários. No experimento 2, no dia 0, 7 vacas (Bos indicus) com FD ≥ 10 mm receberam 16,8 µg de acetato de buserelina (GnRH). A ovulação foi confirmada no dia 3, e as vacas foram alocadas em dois tratamentos: Grupo CL (n = 5) ou Grupo FD (n = 5). No dia 3, as vacas do grupo FD receberam um implante de progesterona (P4; 0,5 g) e 2 mg de benzoato de estradiol (E2) i.m. Nos dias 11 e 13, 0,5 mg de cloprostenol foram administrados, juntamente com a remoção do dispositivo no dia 13. Análises ultrassonográficas foram conduzidas nos dias 0, 3, 11 e13 para confirmar a presença de um CL de 14 dias (grupo CL) e um FD (grupo FD). O abate foi realizado no dia 14, onde também foram colhidas amostras de sangue para análise da P4 circulante. Em ambos os experimentos, a região do istmo da tuba uterina foi dissecada e separada em quatro grupos de acordo com a localização da tuba uterina em relação às estruturas ovarianas presentes, ou seja, CL ou FD (ipsilateral ou contralateral), formando 4 grupos: CL-Contra, CL-Ipsi, FD- Contra e FD-Ipsi. Em ambos os experimentos, o fluido folicular (FF) foi colhido para análise das concentrações de E2 e P4. As células foram cultivadas em meio TCM-199 por 24 horas para formar agregados. Após esse processo, os agregados foram distribuídos em gotas (uma para cada grupo) em uma mesma placa e co-incubados com 1x10 5 espermatozoides móveis por mL. Um pool de palhetas de sêmen de três touros com fertilidade de campo conhecida foi utilizado. Além disso, a motilidade espermática foi avaliada pelo sistema CASA, e a integridade das membranas plasmática e acrossomal foi avaliada por microscopia de fluorescência. Foram realizadas avaliações do número de espermatozoides ligados por mm de agregado celular após 0,5, 12 e 24 horas de co-incubação. A P4 plasmática foi maior nos grupos CL, enquanto a P4 do FF foi maior no CL-Ipsi em ambos os estudos. O E2 do FF foi maior no FD-Ipsi para o experimento 2. O grupo CL-Ipsi apresentou menor ligações espermática por mm de agregado em todos os tempos de análise. Em conclusão, o meio endócrino afetou a capacidade dos espermatozoides de se ligarem às BOEC. Portanto, o melhor modelo in vitro para avaliar a ligação dos espermatozoides como estratégia para avaliação da fertilidade é o de tubas uterinas obtidas de tratos reprodutivos com FD e sem CL
- Imprenta:
- Publisher place: Piracicaba
- Date published: 2024
- Data da defesa: 12.07.2024
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
SOUZA, Paula Renata Cortat de. Spermatozoa binding to bovine oviduct cells: the influence of the endocrine milieu on the effectiveness of the binding test in vitro. 2024. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08102024-115308/. Acesso em: 26 dez. 2025. -
APA
Souza, P. R. C. de. (2024). Spermatozoa binding to bovine oviduct cells: the influence of the endocrine milieu on the effectiveness of the binding test in vitro (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08102024-115308/ -
NLM
Souza PRC de. Spermatozoa binding to bovine oviduct cells: the influence of the endocrine milieu on the effectiveness of the binding test in vitro [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 26 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08102024-115308/ -
Vancouver
Souza PRC de. Spermatozoa binding to bovine oviduct cells: the influence of the endocrine milieu on the effectiveness of the binding test in vitro [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 26 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08102024-115308/ - Factors associated with in vitro embryo production in beef cattle
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Informações sobre o DOI: 10.11606/D.11.2024.tde-08102024-115308 (Fonte: oaDOI API)
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