Efeito da suplementação de esfingosina-1-fosfato durante cultivo embrionário sobre a diferenciação do trofectoderma em embriões bovinos (2024)
- Authors:
- Autor USP: BERLING, FRANCIELI PERRONI - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VRA
- DOI: 10.11606/D.10.2024.tde-14082024-095613
- Subjects: BLASTOCISTO; BOVINOS; GLICOSE
- Keywords: Blastocyst; Glucose; In vitro production; Inner cell mass
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: O desenvolvimento inicial do embrião é marcado pelo primeiro evento de diferenciação celular que define massa celular interna (MCI) e trofectoderma (TE). Em camundongos, a glicose (GLC) é essencial para esse processo e a tensão de oxigênio (O2) também interfere na formação de TE e ainda, há evidências em embriões e em células cultivadas de que a esfingosina-1-fosfato (S1P) pode regular as vias envolvidas neste evento. Nossa hipótese é que a glicose é necessária, a maior tensão de O2 é prejudicial para a diferenciação do TE e que o S1P induz a diferenciação do TE em embriões bovinos produzidos in vitro. Este estudo teve dois objetivos relatados em dois capítulos: 1. Avaliar o efeito da presença (+GLC) ou ausência (-GLC) de GLC em diferentes níveis de O2 (5% ou 20%) na formação do TE em embriões bovinos; 2. Estudar o papel da estimulação S1P na diferenciação de TE adicionando S1P ou o inibidor do receptor S1P, JTE-013. Inicialmente, os embriões foram submetidos aleatoriamente aos tratamentos no dia 1, em delineamento fatorial 2x2, considerando GLC (presente/ausente) e O2 (baixa/alta tensão). No segundo capítulo, usou-se apenas o modelo sem GLC em dois experimentos diferentes. O primeiro experimento consistiu no tratamento com S1P, enquanto o segundo visou a inibição da via com tratamento com JTE-013. As taxas de formação de blastocistos e os blastocistos foram obtidos 180 horas pós-inseminação.Realizou-se para todos os experimentos contagens de células totais, TE (GATA3-positivas) e MCI (GATA3-negativas), bem como análise de qRT-PCR para GATA3, YAP1, SOX2, CDX2, TFAP2C e OCT4. As taxas e contagens de células foram analisadas por ANOVA, enquanto para qRT-PCR foi considerado um modelo linear misto. No primeiro estudo, houve efeito do O2 nas taxas de clivagem, mas não na taxa de blastocistos. Houve interação entre GLC e O2 na contagem de células da MCI, expressão de CDX2 e expressão de SOX2. No segundo capítulo, houve um aumento na taxa de desenvolvimento causada por S1P em comparação ao controle e NaOH, embora não houve alterações induzidas por JTE-013. Células totais e células da MCI estavam aumentadas no grupo S1P em relação ao controle e NaOH. A expressão de CDX2 aumentou nos grupos S1P e NaOH, enquanto TFAP2C diminuiu no grupo S1P. A adição do JTE-013 não interferiu na expressão gênica ou contagem celular. Em conclusão, a diferenciação de TE ocorreu em ausência de glicose e, curiosamente, esta condição aumentou a expressão do gene relacionado ao TE CDX2 quando em maior tensão de O2. Ainda, S1P não modulou positivamente a diferenciação do TE, apesar de aumentar CDX2, mas induziu aumento no número total de células e no número de células MCI, sugerindo uma ação diferente da S1P em embriões bovinos.
- Imprenta:
- Data da defesa: 07.06.2024
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
BERLING, Francieli Perroni. Efeito da suplementação de esfingosina-1-fosfato durante cultivo embrionário sobre a diferenciação do trofectoderma em embriões bovinos. 2024. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14082024-095613/. Acesso em: 07 maio 2025. -
APA
Berling, F. P. (2024). Efeito da suplementação de esfingosina-1-fosfato durante cultivo embrionário sobre a diferenciação do trofectoderma em embriões bovinos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14082024-095613/ -
NLM
Berling FP. Efeito da suplementação de esfingosina-1-fosfato durante cultivo embrionário sobre a diferenciação do trofectoderma em embriões bovinos [Internet]. 2024 ;[citado 2025 maio 07 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14082024-095613/ -
Vancouver
Berling FP. Efeito da suplementação de esfingosina-1-fosfato durante cultivo embrionário sobre a diferenciação do trofectoderma em embriões bovinos [Internet]. 2024 ;[citado 2025 maio 07 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14082024-095613/ - Influence of glucose and oxygen tension on the cell differentiation of in vitro produced bovine embryos
- Influence of glucose and oxygen tension on the trophectoderm and the inner cell mass of in vitro produced bovine embryos
- Influência de uma pré-capacitação espermática e redução do tempo de interação entre gametas na formação de blastocistos bovinos in vitro
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.10.2024.tde-14082024-095613 (Fonte: oaDOI API)
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