Mutação no gene Aire induzida pelo sistema CRISPR-Cas9 em modelo murino in vitro (células epiteliais medulares tímicas): impacto na adesão intercelular e na apresentação de antígeno (2024)
- Authors:
- Autor USP: CASSIANO, ANA CAROLINA MONTELEONE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- DOI: 10.11606/T.17.2024.tde-26072024-133652
- Subjects: ANTÍGENOS; CULTURA DE CÉLULAS; GENES
- Keywords: 3D cell culture; Adesão celular; Antigen presentation; Antigen processing; Apresentação de antígenos; Cellular adhesion; Cultura de células 3D; Esferoides; Gene Aire; IFNγ; MHC II molecule; Molécula de MHC II; mTECs; Processamento de antígenos; Spheroids
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Além de controlar a expressão de antígenos de tecidos periféricos, o gene regulador autoimune (Aire) regula a expressão de genes de adesão em células epiteliais tímicas medulares (mTECs), processo essencial para a interação mTECtimócito. Para que esse processo ocorra, é importante que a arquitetura tridimensional (3D) do timo preserve a camada medular. Camundongos delidos de Aire têm medula tímica desorganizada, não existindo estudos sobre a interação mTEC-mTEC. Neste estudo, avaliamos a adesão mTEC-mTEC em modelo de cultura 3D de timo e o processo de apresentação de antígeno de mTEC do tipo selvagem (WT) e mTEC delida de Aire (E6) no domínio NLS. As células E6 foram obtidas utilizando CRISPR-Cas9. A adesão mTEC-mTEC foi avaliada em modelo in vitro para a formação de esferoides em 3D. Para o ensaio de apresentação de antígeno, utilizamos células WT e E6 estimulada com IFNγ em cocultura com células esplênicas T CD4+ naïve de animais OT II apresentando receptor específico para o peptídeo OVA323-339, na presença ou não de células dendríticas. A ausência de Aire: i) desorganiza a estrutura 3D dos esferoides de mTEC, ii) aumenta a proporção de células na fase G0/G1 do ciclo celular, iii) aumenta a taxa de apoptose de mTEC, iv) diminui a força de adesão mTEC-mTEC, v) promove regulação diferencial dos marcadores de superfície clássicos de mTEC, vi) modula genes que codificam moléculas de adesão, vii) modula genes envolvidos na via de apresentação de antígeno após estímulo com IFNγ (MHC II, CIITA, CD74), e viii) não altera vias de processamento de antígeno na etapa lisossomal. Em contra partida, a transdução (superexpressão) do gene Aire inibe as respostas induzidas por IFNγ. Concluindo, mTECs E6 apresentam diminuição da adesão mTEC-mTEC, sendo este o primeiro estudo a abordar o tema. Embora as mTECs E6 apresentem antígenos de formasemelhante às WT, apenas algumas moléculas relacionadas à apresentação (MHC II e transativadores de moléculas MHC II) e ao processamento de antígenos (CD74) parecem estar sob a influência do gene Aire, no modelo estudado
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2024
- Data da defesa: 19.04.2024
- Este periódico é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
CASSIANO, Ana Carolina Monteleone. Mutação no gene Aire induzida pelo sistema CRISPR-Cas9 em modelo murino in vitro (células epiteliais medulares tímicas): impacto na adesão intercelular e na apresentação de antígeno. 2024. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-26072024-133652/. Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Cassiano, A. C. M. (2024). Mutação no gene Aire induzida pelo sistema CRISPR-Cas9 em modelo murino in vitro (células epiteliais medulares tímicas): impacto na adesão intercelular e na apresentação de antígeno (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-26072024-133652/ -
NLM
Cassiano ACM. Mutação no gene Aire induzida pelo sistema CRISPR-Cas9 em modelo murino in vitro (células epiteliais medulares tímicas): impacto na adesão intercelular e na apresentação de antígeno [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-26072024-133652/ -
Vancouver
Cassiano ACM. Mutação no gene Aire induzida pelo sistema CRISPR-Cas9 em modelo murino in vitro (células epiteliais medulares tímicas): impacto na adesão intercelular e na apresentação de antígeno [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-26072024-133652/ - Evaluation of the antibody profile of patients with chronic renal disease exhibiting panel reactivity against histocompatibility antigens
- Aire gene influences mTEC-mTEC cell aggregation on a three-dimensional spheroid formation model system
- Effect of aire gene on the chemotactic properties of medullary thymic epithelial cells on thymocytes
- The thymus as a mirror of the Body's gene expression
- The absence of the autoimmune regulator gene (AIRE) impairs the three-dimensional structure of medullary thymic epithelial cell spheroids
- A mimetic peptide of ACE2 protects against SARS-CoV-2 infection and decreases pulmonary inflammation related to COVID-19
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.17.2024.tde-26072024-133652 (Fonte: oaDOI API)
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