Avaliação dos efeitos anti-inflamatórios de diferentes hemocomponentes em co-cultura de cartilagem e células derivadas de membrana sinovial de equinos (2024)
- Authors:
- Autor USP: SEIDEL, SARAH RAPHAELA TORQUATO - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VCM
- DOI: 10.11606/T.10.2024.tde-13052024-140116
- Subjects: CARTILAGEM; CÉLULAS; EQUINOS; MEMBRANA SINOVIAL
- Keywords: Co-culture system; Freeze-dried PRP; Platelet lysate; Platelet-rich plasma
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: O uso de ortobiológicos, como o Plasma Rico em Plaquetas (PRP), já é uma realidade na medicina equina há alguns anos, porém segue enfrentando certas limitações relacionadas desde à grande variabilidade de protocolos utilizados até desfechos clínicos por vezes divergentes dos encontrados em ensaios clínicos. Esse estudo foi desenvolvido com dois objetivos principais: validar um protocolo de produção de PRP Liofilizado e Lisado Plaquetário (LP), obtidos a partir de PRP; conduzir um teste pré- clínico mensurando a capacidade anti-inflamatória desses hemocomponentes em co- cultura de tecido articular. Dentre as hipóteses que nos embasaram estão: os hemocomponentes manterão a concentração de fatores de crescimento independente do produto final, e a resposta inflamatória inicial será seguida de resposta resolutiva em ambiente in vitro. A metodologia foi dividida em duas etapas. Primeiramente os três hemocomponentes foram produzidos de seis doadores saudáveis e armazenados em diferentes temperaturas durante 30 dias, sendo mensurados seu conteúdo celular, bioquímico, Fator de Crescimento Transformante β1 (TGF- β1), interleucinas (IL) 1 β, 6 e 10 e Fator de Necrose Tumoral Alfa (TNF-α). Os hemocomponentes de um doador foram selecionados para armazenamento por até dois anos. Na segunda etapa, as co-culturas foram produzidas com explante de cartilagem e células derivadas de membrana sinovial de seis doadores de tecido articular. Dos oito poços de co-cultura,quatro foram estimulados com lipopolissacarídeo, e cada um dos oito poços recebeu um dos quatro tratamentos: meio de cultura, PRP, PRP liofilizado e Lisado Plaquetário. Os explantes foram avaliados histologicamente e por meio de microscopia eletrônica de varredura. As células foram avaliadas quanto à sua viabilidade ao fim da cultura. Nos sobrenadantes foram mensurados concentração de prostaglandina E2 (PGE2), interleucinas 1 beta, 6 e 10, TNF-α, TGF-β1 e glicosaminoglicanos. Os hemocomponentes produzidos na primeira fase apresentaram concentração semelhante de TGF-β1 quando armazenados a -80ºC por trinta dias e dois anos, com diminuição quando armazenados a -20ºC por um ano. A concentração de citocinas diminuiu drasticamente em todos os hemocomponentes armazenados em temperatura ambiente por 30 dias. Com relação às co-culturas, o tratamento com os ortobiológicos resultou em liberação estável de TGF-β1 ao longo do tempo, PGE2 apresentou maiores concentrações em 0 e 48 h, retornando a valores basais em 144 h, enquanto as concentrações de IL-1β, IL-10 e TNF-α apresentaram aumento nas amostras tratadas com PRP e LP em 144 h. Dermatan sulfato (DS) e Condroitin sulfato (CS) resultaram em valores similares em todos os tratamentos em 144 h. Os protocolos utilizados resultaram em hemocomponentes com características semelhantes entre si quando armazenados a -80ºC por 30 dias, e sua utilização como tratamento em sistema de co-cultura detecido articular apresentou perfil inflamatório inicial, seguido de possível fase pró-resolutiva, com aumento dos fatores anti- inflamatórios
- Imprenta:
- Data da defesa: 22.02.2024
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
SEIDEL, Sarah Raphaela Torquato. Avaliação dos efeitos anti-inflamatórios de diferentes hemocomponentes em co-cultura de cartilagem e células derivadas de membrana sinovial de equinos. 2024. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-13052024-140116/. Acesso em: 27 dez. 2025. -
APA
Seidel, S. R. T. (2024). Avaliação dos efeitos anti-inflamatórios de diferentes hemocomponentes em co-cultura de cartilagem e células derivadas de membrana sinovial de equinos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-13052024-140116/ -
NLM
Seidel SRT. Avaliação dos efeitos anti-inflamatórios de diferentes hemocomponentes em co-cultura de cartilagem e células derivadas de membrana sinovial de equinos [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 27 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-13052024-140116/ -
Vancouver
Seidel SRT. Avaliação dos efeitos anti-inflamatórios de diferentes hemocomponentes em co-cultura de cartilagem e células derivadas de membrana sinovial de equinos [Internet]. 2024 ;[citado 2025 dez. 27 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-13052024-140116/ - Correlação entre concentrações plaquetárias e de fator de crescimento TGF-β presente em plasma rico em plaquetas de equinos
- Does double centrifugation lead to premature platelet aggregation and decreased TGF-β1 concentrations in equine platelet-rich plasma?
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Informações sobre o DOI: 10.11606/T.10.2024.tde-13052024-140116 (Fonte: oaDOI API)
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