Caracterização de células endometriais humanas em sistema 3D: o modelo e suas possibilidades de estudo (2024)
- Authors:
- Autor USP: SOUZA, BÁRBARA STEFANY DA SILVA - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMC
- DOI: 10.11606/D.42.2024.tde-27062024-121412
- Subjects: ENDOMÉTRIO; EPITÉLIO; CÉLULAS ESTROMAIS; MATRIZ EXTRACELULAR; CÉLULAS ENDOTELIAIS; TERCEIRA DIMENSÃO; IMUNOFLUORESCÊNCIA; IMUNOHISTOQUÍMICA
- Keywords: células estromais; Endométrio; Endometrium; epitélio uterino; extracellular matrix; matriz extracelular; stromal cells; trofectoderma; trophectoderm; uterine epithelium
- Language: Português
- Abstract: Introdução: A modelagem in vitro de um sistema de cocultivo tridimensional (3D), utilizando células endometriais humanas e eventualmente células embrionárias é uma área inovadora que surge com a possibilidade de aumentar o conhecimento da fisiologia endometrial e da implantação embrionária. Objetivos: Caracterizar um modelo de estudo 3D com células endometriais que permitam estudos da fisiologia uterina. Material e métodos: Células endometriais foram isoladas de biópsias uterinas femininas (n=3), coletadas de acordo com protocolos de ética em pesquisa humana (IC-USP, CONEP). As biópsias foram digeridas com colagenase II/DNAse I e filtradas para retenção das glândulas endometriais. Estas foram tripsinizadas para obtenção de células epiteliais isoladas. Esferas magnéticas anti-CD105 (MACS) foram usadas para a seleção positiva e negativa de células endoteliais e estromais, respectivamente. A pureza das amostras uterinas foi avaliada por imunofluorescência/ imunohistoquímica para as seguintes proteínas: vimentina, citoqueratina, IGFBP1 e CD105/VEGFR2. O sistema de cocultura 3D incluiu a preparação de uma matriz extracelular composta por uma mistura de fibronectina, ácido hialurônico, colágeno V, colágeno I e colágeno III em um sistema Transwell contendo células estromais, sobre a qual as células endoteliais e epiteliais foram plaqueadas. Como um ensaio preliminar, trofectoderma de embriões aneuploides (n=3) foram coletados e inseridos sobre as células endometriais cultivadas em sistema 3D, onde permaneceram por 48 horas e então foram processados para análise histológica.Resultados: O isolamento, cultivo e preparo da matriz de suporte foram padronizados e as culturas caracterizadas. O endométrio reconstituído foi caracterizado morfologicamente por coloração H&E e imunohistoquímica mostrando uma organização típica em que células vimentina-positivas se mantinham viáveis e embebidas pela matriz extracelular. Células endoteliais e epiteliais depositadas sobre essa matriz se organizaram sob a forma de uma monocamada. Apenas um fragmento embrionário constituído por trofectoderma apresentou aderência às células endometriais. Conclusão: O sistema de cocultivo apresentou células endoteliais, epiteliais e estromais viáveis, com características semelhantes às observadas in vivo, no que tange a sua organização tecidual e a expressão de biomarcadores típicos. A adesão do trofectoderma a esta camada sugere que mecanismos associados à implantação embrionária podem ser estudados neste modelo
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- Data da defesa: 19.01.2024
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
SOUZA, Bárbara Stefany da Silva. Caracterização de células endometriais humanas em sistema 3D: o modelo e suas possibilidades de estudo. 2024. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2024. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-27062024-121412/. Acesso em: 02 jan. 2026. -
APA
Souza, B. S. da S. (2024). Caracterização de células endometriais humanas em sistema 3D: o modelo e suas possibilidades de estudo (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-27062024-121412/ -
NLM
Souza BS da S. Caracterização de células endometriais humanas em sistema 3D: o modelo e suas possibilidades de estudo [Internet]. 2024 ;[citado 2026 jan. 02 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-27062024-121412/ -
Vancouver
Souza BS da S. Caracterização de células endometriais humanas em sistema 3D: o modelo e suas possibilidades de estudo [Internet]. 2024 ;[citado 2026 jan. 02 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-27062024-121412/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.42.2024.tde-27062024-121412 (Fonte: oaDOI API)
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