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Desenvolvimento de uma estrutura polimérica tridimensional para avaliar os efeitos de antifúngicos na interação com Aspergillus fumigatus (2023)

  • Authors:
  • Autor USP: FORTES, BRUNA NAKANISHI - ICB
  • Unidade: ICB
  • Sigla do Departamento: BMM
  • DOI: 10.11606/D.42.2023.tde-10062024-084437
  • Subjects: ANTIFÚNGICOS; ASPERGILLUS; BIOFILMES; MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE VARREDURA; CINÉTICA
  • Keywords: Aspergillus fumigatus, andaime; Aspergillus fumigatus, scaffold; biofilm; biofilme; cultura celular tridimensional; three-dimensional cell culture
  • Language: Português
  • Abstract: Aspergillus fumigatus é o principal responsável por causar aspergilose, sendo a forma invasiva está associada a maior gravidade em imunocomprometidos e às altas taxas de mortalidade. O estudo da patogênese dessa doença e a descoberta de novos tratamentos se torna essencial, principalmente em metodologias que mimetizam o principal órgão alvo, o pulmão. O andaime é uma estrutura que mimetiza a matriz extracelular e melhorar a adesão e proliferação das células. Desse modo, este trabalho tem como objetivo padronizar o andaime tridimensional de hidroxietil-alginato-gelatina (HAG) e avaliar a adesão de células epiteliais pulmonares e do biofilme de A. fumigatus, bem como o tratamento desse biofilme. A produção do andaime tem como base o alginato e a gelatina e a reação de polimerização ocorre em baixas temperaturas, formando um criogél de HAG. O andaime HAG apresentou boa estabilidade quando imerso em líquido e em temperatura corporal, degradando apenas de 20-30% do peso na primeira semana e se mantendo estável por até 5 semanas. O andaime HAG apresentou alta cinética de inchamento em água e características elásticas, com base no estudo de reologia. As imagens da microscopia de luz, de fluorescência e eletrônica de varredura mostraram poros médio de 190 μm distribuídos de forma homogênea, revelando uma estrutura semelhante ao parênquima pulmonar.O andaime HAG não mostrou ser tóxico para A. fumigatus e nem para células pulmonares, após a imersão na glicina. Inicialmente, as células encontraram dificuldade em se aderir e proliferar no andaime, mas com a adição de laminina e o aumento do tempo de cultivo celular a proliferação e adesão celular melhoraram. Porém, isso não foi observado quando foi adicionado laminina e colágeno ao andaime. O biofilme das cepas 1304 e ATCC 16913 de A. fumigatus se estabeleceram muito bem no andaime HAG constituindo um modelo tridimensional para estudos de biofilmes. O tratamento com anfotericina B ou voriconazol sobre os biofilmes tridimensionais revelou ter a mesma ação quando o tratamento foi adicionado no modelo bidimensional, mostrando uma equivalência entre os dois modelos. A cultura tridimensional de células pulmonares e de A. fumigatus e tratamento antifúngico.
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 02.06.2023
  • Acesso à fonteAcesso à fonteDOI

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    • ABNT

      FORTES, Bruna Nakanishi. Desenvolvimento de uma estrutura polimérica tridimensional para avaliar os efeitos de antifúngicos na interação com Aspergillus fumigatus. 2023. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2023. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-10062024-084437/. Acesso em: 01 abr. 2026.
    • APA

      Fortes, B. N. (2023). Desenvolvimento de uma estrutura polimérica tridimensional para avaliar os efeitos de antifúngicos na interação com Aspergillus fumigatus (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-10062024-084437/
    • NLM

      Fortes BN. Desenvolvimento de uma estrutura polimérica tridimensional para avaliar os efeitos de antifúngicos na interação com Aspergillus fumigatus [Internet]. 2023 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-10062024-084437/
    • Vancouver

      Fortes BN. Desenvolvimento de uma estrutura polimérica tridimensional para avaliar os efeitos de antifúngicos na interação com Aspergillus fumigatus [Internet]. 2023 ;[citado 2026 abr. 01 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-10062024-084437/


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